人源化抗苏云金芽孢杆菌Cry1Ab毒素单域抗体的筛选及活性鉴定

来源：中国食品学报杂志2017年第10期北京时间：

作者：焦凌霞; 徐茜茜; 刘媛; 张宵; 梁颖; 刘贤金

单位：焦凌霞; 徐茜茜; 刘媛; 张宵; 梁颖; 刘贤金江苏省食品质量安全重点实验室农业部食用农产品安全监控重点开放实验室;河南科技学院食品学院;,

摘要：以Cry1Ab毒素作为抗原,将扩增后的噬菌体单域抗体库与固相化包被的Cry1Ab毒素特异性结合,利用噬菌体展示技术从人源化噬菌体单域抗体库(DAB)中筛选抗Cry1Ab毒素的单域抗体。采用正负筛选方法,经4轮吸附-洗脱-扩增后,富集特异性识别Cry1Ab毒素的噬菌体单域抗体。第4轮筛选得到的单菌落经单克隆ELISA鉴定,获得6株对Cry1Ab毒素具有较强结合活性的阳性单域抗体菌株,经PCR鉴定和DNA测序,均有完整的单域抗体基因片段插入。对6株阳性克隆的氨基酸序列进行比对分析,其序列差异主要存在于单域抗体的CDR区。

关键词：Cry1Ab毒素;;单域抗体;;噬菌体展示技术;;正负筛选;;ELISA

基金资助：国家自然科学基金重点项目(31630061);; 江苏省博士后科研资助计划(1401016A);; 江苏省农业自主创新项目(cx(15)1016,cx(13)3087)