多重串联式PCR基因碟片技术检测转基因大豆GTS 40-3-2

来源：中国食品学报杂志2018年第2期北京时间：

作者：魏霜; 周广彪; 刘津; 付伟; 张志强; 吴希阳

单位：魏霜; 周广彪; 刘津; 付伟; 张志强; 吴希阳暨南大学食品科学与工程系;广东出入境检验检疫局;汕头出入境检验检疫局;中国检验检疫科学研究院;香港中文大学食品科学与营养系;,

摘要：建立多重串联式PCR(MT-PCR)的基因碟片技术用于转基因大豆GTS40-3-2的检测。针对GTS 40-3-2的常见外源基因NOS终止子、CP4-EPSPS、Ca MV35S启动子和大豆内源基因Lectin设计引物,同时针对外源基因插入位点的旁临序列设计品系特异性引物。首先进行一次循环数较少(15 cycles),引物浓度较低(0.1μmol/L)的高通量多重PCR,以均匀地扩增各基因模板,同时避免引物之间的竞争,然后利用巢式荧光定量PCR检测各个基因。根据熔融曲线分析结果,灵敏度高于普通荧光定量PCR法1个数量级。该方法能够快速、高通量、准确地检测转基因大豆GTS40-3-2中的多种转基因成分,并能对该品系进行分析,重复性好,适合转基因的高通量、定量检测,可用于特异性检测转基因大豆GTS40-3-2,具有较好的应用价值。

关键词：转基因;多重串联式PCR;检测

基金资助：广州市科技计划项目(2014J4100105); 广东省科技计划项目(2014A040401029)