基于生物量产率的低产乙醇酿酒酵母的筛选

来源：中国食品学报杂志2018年第4期北京时间：

作者：杜青; 刘延琳; 贾鹤; 鲁素蕊; 刘喜喜; 孙晶; 管玉清; 秦义

单位：杜青; 刘延琳; 贾鹤; 鲁素蕊; 刘喜喜; 孙晶; 管玉清; 秦义西北农林科技大学葡萄酒学院;西北农林科技大学合阳葡萄试验示范站;,

摘要：目的:建立一种从酿酒酵母突变库中快速筛选低产乙醇酵母菌株的方法。方法:以转录因子spt15随机突变酿酒酵母文库为研究模型,以高生物量产率作为低产乙醇酿酒酵母的筛选标记,利用24孔板对spt15突变酵母文库进行初筛。对初筛获得的目标菌株,以乙醇产量作为筛选标记进行复筛,最终获得乙醇合成能力较低且生物量较高的酿酒酵母菌株。结果:(1)利用易错PCR技术构建了spt15随机突变文库,并将其转化至酿酒酵母YS59,获得酿酒酵母YS59 spt15突变文库;(2)经初筛,获得14株生物量产率≥70%的酿酒酵母YS59 spt15突变菌株;(3)通过复筛,筛选出编号712的低产乙醇突变菌株,其乙醇合成量降低了28.1%;(4)通过序列比对,发现spt15-712上有9个碱基发生突变,分别是A161G,T426C,T462C,T493A,A506G,T546C,T622C,T658C,A750T9。结论:成功建立了一种高通量筛选低产乙醇酿酒酵母的方法 ,并利用这种方法筛选出乙醇合成量降低28.1%的低产乙醇突变菌株。

关键词：酿酒酵母;生物量产率;低产乙醇;spt15;突变

基金资助：国家重点研发计划项目(2016YFD0400504-01); “十二五”国家科技支撑计划项目(2012BAD31B07); 国家自然科学基金项目(31301541); 中央高校基本科研业务费项目(含第二批)(QN2013021)