跨越式滚环扩增(SRCA)结合金纳米粒子可视化检测食品中的沙门氏菌

来源：中国食品学报杂志2024年第3期北京时间：

作者：董贺楠，张蕴哲，徐慧，檀建新，张伟，袁耀武

单位：董贺楠河北农业大学食品科技学院 河北保定 071001,张蕴哲河北农业大学食品科技学院 河北保定 071001,徐慧河北农业大学理工系 河北沧州 061100,檀建新河北农业大学食品科技学院 河北保定 071001,张伟河北农业大学食品科技学院 河北保定 071001;河北农业大学生命科学学院 河北保定 071001;河北省人畜共患病原微生物分析与防控重点实验室 河北保定 071000,袁耀武河北农业大学食品科技学院 河北保定 071001,yuanyaowu1970@163.com

摘要：沙门氏菌是引起全球人类腹泻病的主要病因，严重危害人畜健康。传统检测方法耗时长，步骤繁琐，因此开展快速简便灵敏的可视化检测方法，具有重要意义。本文设计能与靶序列结合的探针，将其与金纳米粒子(AuNPs)结合。经跨越式滚环等温扩增技术(SRCA)扩增的靶序列，高温变性后成为单链，其与金纳米粒子上的探针结合后，释放出金纳米粒子，在MgSO4的作用下，聚集呈现肉眼可见的蓝色，判定为阳性，阴性为紫色。依此，建立一种简便、快捷、灵敏的可视化检测方法。结果表明:该方法特异性良好，能够区分8株沙门氏菌阳性与8株非沙门氏菌阴性。可视化检测的灵敏度为5.5×100 CFU/mL。将牛奶样品人工污染沙门氏菌，检出限为3.7×100 CFU/mL。在50份实际样品检测中，与GB 4789.4-2016方法进行比较，该方法敏感性为100.00%，特异性为97.87%，符合率达到98.00%。本文建立的SRCA-AuNPs可视化检测方法，具有较高的应用价值，结果肉眼可见，适合于现场可视化检测和基层单位使用。

关键词：沙门氏菌; 跨越式滚环等温扩增(SRCA); 金纳米粒子; 可视化

基金资助：国家自然科学基金项目(32172288，31371772)；河北省自然科学基金重点项目(C2019204342)；中央引导地方科技发展资金项目(216Z5501G)；河北省外专百人计划项目(360-0803-JSN-3YGS)