青刺果ACE抑制肽的分离纯化、结构鉴定及其体外活性评价

来源：中国食品学报杂志2024年第7期北京时间：

作者：张璐，甘雨嫣，钟玉旺，黎依艳，范江平，王雪峰

单位：张璐云南农业大学食品科学技术学院 昆明 650201,甘雨嫣云南农业大学食品科学技术学院 昆明 650201,钟玉旺云南农业大学食品科学技术学院 昆明 650201,黎依艳云南农业大学食品科学技术学院 昆明 650201,范江平云南农业大学食品科学技术学院 昆明 650201;云南省畜产品加工工程技术研究中心 昆明 650201,王雪峰云南农业大学食品科学技术学院 昆明 650201;云南省畜产品加工工程技术研究中心 昆明 650201,364135728@qq.com

摘要：以具有血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性的青刺果蛋白酶解物为研究对象，采用超滤、强阴离子交换层析分离纯化ACE抑制肽，液相色谱-串联质谱鉴定其肽序列。采用傅里叶红外光谱、酶反应抑制剂动力学、MTT试验和分子对接技术解析其二级结构特征、体外活性以及与ACE的结合机制。结果表明，分子质量<3 ku的超滤组分活性较好(IC50=0.380 mg/mL)，离子交换层析后以F-a组分活性最好(IC50=0.159 mg/mL)。质谱鉴定出4条肽序列，通过生物信息学分析确定肽PGDVF为潜在的ACE抑制肽[IC50=(0.56±0.1) mmol/L]。二级结构分析表明PGDVF由α-螺旋(20.28%)、β-折叠(6.21%)、β-转角(31.55%)和无规则卷曲(41.85%)构成，其抑制模型为非竞争性抑制，肽质量浓度小于1 mg/mL时，对HepG2细胞无毒性。分子对接显示PGDVF可通过氢键、疏水作用与ACE紧密结合，从而有效抑制ACE活性。研究结果可为青刺果降压肽的开发利用提供参考。

关键词：青刺果; ACE抑制肽; 液相色谱-串联质谱; 二级结构; 分子对接

基金资助：国家自然科学基金地区项目(31960462)；云南省基础研究计划面上项目(2019FB052)；云南省农业联合专项重点项目(202101BD070001-013)；云南省青年科技人才托举工程项目