带电短肽T7+、T6-对α-淀粉酶活性和构象的影响

来源：中国食品学报杂志2024年第7期北京时间：

作者：杨晓钰，李传博，刘春莹，孙付保，窦少华

单位：杨晓钰大连大学生命健康学院 辽宁大连 116622;辽宁省海洋微生物工程技术研究中心 辽宁大连 116622;大连市动物免疫重点实验室 辽宁大连 116622,李传博大连大学生命健康学院 辽宁大连 116622;辽宁省海洋微生物工程技术研究中心 辽宁大连 116622;大连市动物免疫重点实验室 辽宁大连 116622,刘春莹大连大学生命健康学院 辽宁大连 116622;辽宁省海洋微生物工程技术研究中心 辽宁大连 116622;大连市动物免疫重点实验室 辽宁大连 116622,孙付保江南大学生物工程学院 江苏无锡 214122,窦少华大连大学生命健康学院 辽宁大连 116622;辽宁省海洋微生物工程技术研究中心 辽宁大连 116622;大连市动物免疫重点实验室 辽宁大连 116622,doushaohua@dlu.edu.cn

摘要：利用带不同电荷的短肽T7+、T6-，探讨正电荷短肽T7+和负电荷短肽T6-对α-淀粉酶的活性和构象的影响。将短肽加入α-淀粉酶体系后，测定其相对酶活、米氏常数(Km)、活化能、Zeta电位等指标。为了更清晰地观察不同带电量的短肽对α-淀粉酶构象的影响，通过紫外吸收光谱、荧光光谱、同步荧光光谱、圆二色光谱进一步考察α-淀粉酶构象的变化。结果表明，将带电短肽加入α-淀粉酶的酶促反应中，正电荷短肽T7+抑制α-淀粉酶酶活，当短肽质量浓度为10-7 g/mL时，α-淀粉酶相对酶活降低2.40%，同时也使α-淀粉酶与可溶性淀粉的亲和力降低，活化能升高，Zeta电位增加。负电荷短肽T6-促进α-淀粉酶酶活，当短肽质量浓度为10-7 g/mL时，α-淀粉酶相对酶活升高1.40%，同时也使α-淀粉酶与可溶性淀粉的亲和力升高，活化能降低，Zeta电位增加。光谱分析表明，不同带电短肽使α-淀粉酶的紫外-可见吸收光谱、荧光光谱以及二级结构发生不同程度的改变。这表明不同带电短肽可以发挥与电场相似的作用，即电场在作用于蛋白质时，产生的电场力促使蛋白质构象发生改变，人工设计合成短肽所带的表面电荷影响酶表面电荷的分布，进而导致酶的活性和构象发生改变。

关键词：α-淀粉酶; 带电短肽; 相对酶活; 构象

基金资助：辽宁省教育厅高校基本科研面上项目(JYTMS