肉源隆德假单胞菌和致腐菌的混合生物被膜形成特征

来源：中国食品学报杂志2024年第10期北京时间：

作者：吴诗媛，张俊，鲁重，陆海霞，朱军莉

单位：吴诗媛浙江工商大学食品与生物工程学院 杭州 310018,张俊浙江工商大学食品与生物工程学院 杭州 310018,鲁重浙江工商大学食品与生物工程学院 杭州 310018,陆海霞浙江工商大学食品与生物工程学院 杭州 310018,朱军莉浙江工商大学食品与生物工程学院 杭州 310018,junlizhu0305@163.com

摘要：为探究肉类优势腐败菌群的混合生物被膜互作规律，采用结晶紫法、苯酚硫酸法、二喹啉甲酸法和激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)观察等分析在15 ℃和25 ℃肉源分离株隆德假单胞菌(PL)与3种致腐菌的混合生物被膜特性，及对蛋白酶和消毒剂耐受性的影响。结果表明，从腐败牛肉中分离鉴定的23株菌中，假单胞菌属占43.5%，其次为热杀索丝菌、不动杆菌属和类香味菌属。将优势腐败菌隆德假单胞菌与约翰逊不动杆菌、热杀索丝菌及类香味菌共培养，发现低温显著促进双菌混合生物被膜的形成。PL、AJ、BT在15 ℃时的生物被膜形成量均显著高于25 ℃时的，混合生物被膜在15 ℃时的形成量显著高于PL单培养的。PL与AJ共培养时，被膜菌数目比单培养时高0.75~0.78 lg(CFU/cm2)，15 ℃共培养时，胞外多糖分泌量增加15.67~22.01 μg/mL，与AJ、BT共培养的胞外蛋白分泌量分别增加7.35，6.70 μg/mL。CLSM观察发现PL与MP或AJ混合生物被膜聚集团聚，形成不均一结构，被膜厚度增至48.99~49.22 μm。此外，混合生物被膜的形成，显著提高假单胞菌的蛋白酶活性和化学耐受性。经0.06%次氯酸钠处理后，15 ℃时PL与AJ、BT混合被膜残留率高达95.61%，96.16%，显著高于PL单培养。结论:肉源致腐菌PL与3种致腐菌形成结构复杂的混合被膜，在低温环境下被膜菌增强对次氯酸钠的抵抗性，为探究肉源腐败微生物混合被膜的污染和控制奠定良好的基础。

关键词：隆德假单胞菌; 混合生物被膜; 耐受性; 腐败; 蛋白酶

基金资助：浙江省自然科学基金重点项目(LZ23C200002)；浙江省基础公益项目(LGN20C200007)