基于微滴式数字PCR定量牛肉中的鸭源性成分

来源：中国食品学报杂志2024年第12期北京时间：

作者：马小玉，徐慧丽，王正亮，俞晓平

单位：马小玉中国计量大学生命科学学院 浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室 杭州 310018,徐慧丽中国计量大学生命科学学院 浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室 杭州 310018,王正亮中国计量大学生命科学学院 浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室 杭州 310018,

摘要：采用微滴式数字PCR(ddPCR)技术建立一种牛肉中鸭源性成分的检测方法。以牛和鸭的单拷贝核基因ACTB为靶基因，合成特异性引物和探针。通过引入一个固定的常数K(转换系数)，直接将ddPCR测定的DNA拷贝数转换为肉类的质量分数。根据模拟混合样本中已知的肉质量分数和实际测得的DNA拷贝数之间的关系，计算和验证K值，进而建立牛肉中鸭源性成分的计算公式，并用于牛肉/鸭肉人工模拟混合样本和市售牛肉制品中鸭源性成分的定量检测。结果表明，所建立的ddPCR方法能特异性定量检测牛肉中鸭源性成分，K值为0.16，定量检测公式为MD/MB = 0.16×QD/QB，式中MD和MB分别为鸭肉和牛肉的质量；QD和QB分别为鸭和牛ACTB的拷贝数。牛肉中掺杂鸭肉的质量分数在1%~90%范围，该函数均具有较好的线性关系，R2>0.99。该定量方法的检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为0.1%和0.5%。人工模拟混合样本中鸭肉粉质量分数为20%~80%时，检测结果绝对误差均<1.0%。16份市售牛肉制品样本中，2份被检出鸭源性成分，含量分别为44.87%和18.21%，与商品标签不符。本研究建立的ddPCR方法具有良好的特异性、灵敏性、准确性和适用性，可实现牛肉中鸭源性成分的定量检测，为我国牛肉及其制品质量安全监管提供技术支撑。

关键词：微滴式数字PCR; 牛肉; 鸭源性成分; 定量检测

基金资助：浙江省重点研发项目(2018C02041)；浙江省属高校基本科研业务费专项项目(2022YW82)