基于杂交链式反应的新型荧光适体传感器检测食品中的OTA

来源：中国食品学报杂志2025年第1期北京时间：

作者：贾耀博，张蕴哲，李子坤，卢鑫，徐慧，张伟

单位：贾耀博河北农业大学食品科技学院 河北保定 071000,张蕴哲河北农业大学食品科技学院 河北保定 071000,李子坤河北农业大学 河北保定 071000,卢鑫河北农业大学理工系 河北沧州 061100,徐慧河北农业大学理工系 河北沧州 061100,张伟河北农业大学食品科技学院 河北保定 071000;河北农业大学理工系 河北沧州 061100;河北农业大学生命科学学院 河北保定 071000;河北省人畜共患病原微生物分析与防控重点实验室 河北保定 071000,

摘要：赭曲霉毒素A(OTA)是一种常见的霉菌毒素，常常污染食品，造成不同程度的危害。为开发一种基于杂交链式反应(HCR)的新型荧光适体传感器，用于快速灵敏地检测食品中的OTA，首先将OTA与适体结合，释放出触发链cDNA，进而触发发卡HP1与HP2发生HCR反应，使HP1中的G-四链体序列形成G-四链体结构，与此同时N-甲基中卟啉IX(NMM)染料插入到G-四链体结构中，从而显著增强荧光信号。通过荧光信号强度的变化，实现对OTA无酶、免荧光标记的定量检测。结果表明:本方法特异性强，在7组试验中，含有OTA的两组试验结果均是阳性，不含OTA的5组试验结果均为阴性。其线性回归方程为Y = 0.71133lgCOTA+3.21383，相关系数R2=0.9942，线性范围为0.1 pg/mL~5 ng/mL，检出限为0.1 pg/mL。将该方法应用于小麦、红酒和咖啡人工加标样品的检测，其回收率均在92%~97.88%之间，高于ELISA试剂盒的回收率(90.5%~95.78%)，表明该方法的检测结果优于国标方法。本研究开发的新型荧光适体传感器可实现对食品中OTA的快速、灵敏、特异和准确地检测，也为其它毒素以及影响食品安全的其它化学污染物的快速检测提供了新思路。

关键词：赭曲霉毒素A; 杂交链式反应; G-四链体; 荧光适体传感器; 检测

基金资助：国家自然科学基金项目(32172288，31371772)；河北省自然科学基金重点项目(C2019204342)；中央引导地方科技发展资金项目(216Z5501G，226Z5503G，236Z5502G)；河北省外专百人计划项目(360-0803-JSN-3YGS)；河北省博士后科研项目(B2021005007)；河北省重点研究开发计划项目(18275501D)；河北省教育厅科研项目(QN2022073)；河北省自然科学基金项目(C2019204284)