《中国食品学报杂志》发表论文赏析
作者:崔保宇,卢海强,王玉印,刘琼,田洪涛,谷新晰
单位:崔保宇河北农业大学食品科技学院 河北保定 071001,卢海强河北农业大学食品科技学院 河北保定 071001,王玉印河北农业大学食品科技学院 河北保定 071001,刘琼北京盛拓达生物技术有限公司 北京 100193,田洪涛河北农业大学食品科技学院 河北保定 071001,谷新晰河北农业大学食品科技学院 河北保定 071001,helloguxinxi@163.com
摘要:基于毕赤酵母的密码子偏好性及高效表达规律,对嗜热烟曲霉来源的超氧化物歧化酶afSOD基因进行优化,使GC含量由59%降至41%,CAI值由0.69优化为0.96,优化前、后基因序列一致性为73.8%。经测定,重组菌株诱导72 h,酶活力可达213.78 U/mL。该重组酶AfSOD在pH 8.0和40 ℃条件下,具有最高催化活力,在中性环境和40~50 ℃稳定。金属离子Cu2+对该酶活性的促进作用尤为显著,5 mmol/L的Cu2+酶活提高80%,而Fe2+则表现出明显的抑制效应。重组酶AfSOD对DPPH和羟自由基具有明显的清除作用,分别达到(97.65±1.46)%和(89.48±2.53)%。此外,重组酶AfSOD的高效表达可显著增强酵母菌株对温度、渗透压、盐、乙酸和乙醇的耐受性。本研究不仅为超氧化物歧化酶高效制备提供了一定的技术支撑,也为增强酵母菌生产耐受性提供理论参考。
关键词:超氧化物歧化酶; 密码子优化; 高效表达; 酶学性质; 耐受性
基金资助:国家自然科学基金青年科学基金项目(31901631)