《中国食品学报杂志》发表论文赏析
作者:杜小琴,夏炎,张万超,何靖柳,张小琴,吴中宝
单位:杜小琴重庆市药物种植研究所 特色生物资源研究与利用川渝共建重点实验室 重庆 408435,夏炎重庆市药物种植研究所 特色生物资源研究与利用川渝共建重点实验室 重庆 408435,张万超重庆市药物种植研究所 特色生物资源研究与利用川渝共建重点实验室 重庆 408435,何靖柳雅安职业技术学院 四川雅安 625000,张小琴重庆市药物种植研究所 特色生物资源研究与利用川渝共建重点实验室 重庆 408435,吴中宝重庆市药物种植研究所 特色生物资源研究与利用川渝共建重点实验室 重庆 408435,wuzhognbao7788@sina.com
摘要:为研究不同提取方法的灵芝多糖(GLP)对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞体外抗炎活性,以回流提取、复合酶法提取、植物乳杆菌发酵+回流提取、植物乳杆菌发酵+复合酶法提取4种方法提取GLP。以LPS诱导建立RAW264.7细胞炎症模型,加入GLP处理24 h,采用CCK-8法检测GLP对RAW264.7细胞生存率的影响,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达水平,免疫印迹检测JNK/P38 MAPK信号通路蛋白的表达。结果表明:质量浓度在200 μg/mL及以下的4种GLP作用于RAW264.7细胞时,细胞存活率为93%以上。与LPS相比,4种方法提取的GLP均可显著(P<0.05)影响RAW264.7细胞炎症因子TNF-α、IL-6、IL-10、iNOS的mRNA表达水平。与回流提取GLP相比,植物乳杆菌发酵+回流提取GLP可显著(P<0.05)抑制TNF-α、IL-6的mRNA表达及促进IL-10的mRNA表达。与另外3种方法提取GLP相比,植物乳杆菌发酵+复合酶法提取GLP可显著(P<0.05)抑制iNOS的mRNA表达水平。与回流提取和复合酶法提取GLP相比,经植物乳杆菌发酵后提取的2种GLP,均能显著(P<0.05)降低P-JNK、P-P38的蛋白表达。GLP具有较好的体外抗炎活性,不同提取方法对GLP体外抗炎活性的影响较大,其中植物乳杆菌发酵后提取的GLP具有更显著的抗炎活性。
关键词:微生物发酵; 灵芝多糖; 抗炎活性; JNK/P38 MAPK信号通路
基金资助:国家重点研发计划项目(2021YFD1601005)