菠菜中促进激肽释放酶(KLK)活性的多肽纯化和鉴定

来源：中国食品学报杂志2025年第3期北京时间：

作者：顾双，谢琳，凌巧佳，王向阳

单位：顾双浙江工商大学食品与生物工程学院 杭州 310018,谢琳浙江工商大学食品与生物工程学院 杭州 310018,凌巧佳浙江工商大学食品与生物工程学院 杭州 310018,王向阳浙江工商大学食品与生物工程学院 杭州 310018,wangxiangyang@zjsu.edu.cn

摘要：目的:激肽释放酶(KLK)是激肽释放酶-激肽系统(KKS)的重要组成部分，在降血压等方面扮演重要角色。前人对食物成分影响KLK的研究较少。方法:选择18种蔬菜(胡萝卜、大蒜、紫甘蓝、娃娃菜、菠菜、芹菜、韭菜、西兰花、金针菇、苦瓜、黄瓜、山药、生姜、西红柿、南瓜、青椒、马铃薯和香菇)，分别用水提取、乙醇提取和胃蛋白酶酶解后提取，测定其对KLK活性的影响，从中选出7种蔬菜(菠菜、南瓜、生姜、大蒜、西红柿、苦瓜和马铃薯)提取蛋白质，进行胃蛋白酶酶解和体外胃肠道模拟消化试验。选出促进KLK活性最强的菠菜多肽，采用葡聚糖凝胶层析和制备型高效液相色谱技术进行分离纯化，二级质谱鉴定多肽的氨基酸序列，通过该多肽与KLK进行分子对接，分析其作用机制。结果:18种蔬菜中有7种蔬菜多肽显著促进KLK的活性，7种乙醇提取液显著抑制KLK活性。经胃蛋白酶、胰蛋白酶酶解后的菠菜多肽显著增强KLK活性，该多肽是1条十肽，其氨基酸序列为His-Asn-Ser-Pro-Gly-Tyr-Tyr-Asp-Gly-Arg。该多肽与KLK有两个对接点。N端促进KLK的稳定性，C端对促进KLK活性起主要作用。结论:大蒜、南瓜和马铃薯的酶解液促进KLK活性，但其乙醇提取液抑制KLK活性，菠菜的HNSPGYYDGR多肽显著促进KLK活性。

关键词：激肽释放酶; 菠菜; 多肽; 酶活性

基金资助：浙江省自然科学基金探索公益项目(LTGN24C 200003)；浙江省教育厅科研项目(Y202250368)