双重实时荧光聚合酶链式反应鉴别真鲷鱼与罗非鱼

来源：中国食品学报杂志2025年第7期北京时间：

作者：李杰，傅黎莉，卢娜，王海洋，赵玉强，祝磊，钱云开

单位：李杰临沂市检验检测中心 山东临沂 276000,傅黎莉临沂市检验检测中心 山东临沂 276000,卢娜临沂市检验检测中心 山东临沂 276000,王海洋秦皇岛海关技术中心 河北秦皇岛 066004,赵玉强秦皇岛海关技术中心 河北秦皇岛 066004,祝磊青岛滨海学院医学院 山东青岛 266000,钱云开秦皇岛海关技术中心 河北秦皇岛 066004,qyk-1@163.com

摘要：目的:建立1种利用实时荧光聚合酶链式反应(PCR)技术快速检测3种真鲷鱼与11种罗非鱼源性成分的方法。方法:以真赤鲷、金赤鲷、蓝点赤鲷cytb基因以及尼罗罗非鱼、莫桑比克罗非鱼、奥利亚罗非鱼COI基因为目标基因，分别设计2组引物和Taqman探针的组合物，以期鉴别真鲷鱼和罗非鱼成分。结果:该方法特异性良好，耗时短，反应只需1 h。实时荧光PCR试验中，真鲷鱼和罗非鱼的基因组DNA检出限均为10-2 ng，质量分数检出限为0.1%。质量分数定量试验中，真鲷鱼的质量分数误差不超过±5.5%，罗非鱼的质量分数误差不超过±4.9%。双重实时荧光PCR试验中，真鲷鱼和罗非鱼的基因组DNA检出限均为10-2 ng，当真鲷鱼和罗非鱼以不同质量分数混合时，真鲷鱼的质量分数检出限为20%，罗非鱼的质量分数检出限为0.1%；当真鲷鱼和罗非鱼以相同质量分数混合时，真鲷鱼的质量分数检出限为10%，罗非鱼的质量分数检出限为0.01%。结论:该方法特异性强，所需时间短，检出限低，操作简单，可满足真鲷鱼与罗非鱼真伪鉴别的要求。

关键词：真鲷鱼; 罗非鱼; 双重实时荧光聚合酶链式反应; 检测; 鉴别

基金资助：国家市场监督管理总局科技计划项目(2023MK079)；河北省重点研发计划项目(213777109D)；海关总署科研项目(2020HK229)；山东省医药卫生科技发展计划项目(202102050495)