基于流式细胞术的鸡肉中单增李斯特氏菌活菌检测方法

来源：中国食品学报杂志2025年第10期北京时间：

作者：庞慧敏，刘思渊，蔡小雨，张蕴哲，隋志伟，张伟

单位：庞慧敏河北农业大学食品科技学院 河北保定 071001;中国计量科学研究院前沿计量科学中心 北京 100029,刘思渊河北农业大学食品科技学院 河北保定 071001;中国计量科学研究院前沿计量科学中心 北京 100029,蔡小雨河北农业大学食品科技学院 河北保定 071001;中国计量科学研究院前沿计量科学中心 北京 100029,张蕴哲河北农业大学食品科技学院 河北保定 071001,隋志伟中国计量科学研究院前沿计量科学中心 北京 100029,

摘要：单增李斯特氏菌是一种致死率较高的食源性病原菌，可通过受污染的食品传播。鸡肉是单增李斯特氏菌的高风险食品，为了快速、准确定量鸡肉中的单增李斯特氏菌，本研究建立了一种基于流式细胞术(FCM)结合叠氮溴化丙锭(PMA)以及荧光原位杂交(FISH)技术的单增李斯特氏菌活菌检测方法。首先，使用PMA来区分样品中的死菌与活菌，然后基于FISH技术的寡核苷酸探针来特异性识别单增李斯特氏菌，最后使用FCM分析双重染色信号，实现单增李斯特氏菌活菌的定量。结果表明:该方法特异性良好，能够准确区分死、活菌。该方法可在3.5 h内完成鸡肉样品预处理、双重染色和FCM分析。该方法能够回收鸡肉样品中96.7％以上的单增李斯特氏菌，检测范围102~107 cells/g，并与食品中单增李斯特氏菌检测的“金标准”平板计数法具有良好的线性关系(R2 = 0.9983)。本研究建立的PMA-FISH-FCM法可以快速、特异、准确地定量鸡肉中单增李斯特氏菌活菌，为鸡肉产品在生产、销售和流通中的质量监测提供了一种有效的检测方法。

关键词：流式细胞术; 单增李斯特氏菌; 荧光原位杂交; 活菌检测

基金资助：国家重点研发计划项目(2023YYF0724504)；国家市场监督管理总局技术保障专项(2023YJ02)；国家自然科学基金项目(32172288，31371772)；河北省自然科学基金重点项目(C2019204342)；河北省生物农业联合基金项目(C2023204200，C2023204241)；中央引导地方科技发展基金项目(226Z5503G，236Z5502G，246Z5501G，246Z 5502G)；河北省博士后科研项目(B2021005007)；河北省研究生创新能力培养资助项目(CX