几丁质酶抑制剂筛选平台的构建及其生物活性评价

来源：中国食品学报杂志2026年第2期北京时间：

作者：王文娣，范晓英，赵雪，徐佳楠，苟强强，杜文韬，OMER Hassan Ali Hassan，张新国

单位：王文娣兰州理工大学生命科学与工程学院 甘肃省中藏药筛选评价及深加工重点实验室 兰州 730050,范晓英兰州理工大学生命科学与工程学院 甘肃省中藏药筛选评价及深加工重点实验室 兰州 730050,赵雪兰州理工大学生命科学与工程学院 甘肃省中藏药筛选评价及深加工重点实验室 兰州 730050,徐佳楠兰州理工大学生命科学与工程学院 甘肃省中藏药筛选评价及深加工重点实验室 兰州 730050,苟强强兰州理工大学生命科学与工程学院 甘肃省中藏药筛选评价及深加工重点实验室 兰州 730050,杜文韬兰州理工大学生命科学与工程学院 甘肃省中藏药筛选评价及深加工重点实验室 兰州 730050,OMER Hassan Ali Hassan兰州理工大学生命科学与工程学院 甘肃省中藏药筛选评价及深加工重点实验室 兰州 730050,张新国兰州理工大学生命科学与工程学院 甘肃省中藏药筛选评价及深加工重点实验室 兰州 730050,biodrug@163.com

摘要：目的:建立一种几丁质酶抑制剂的快速筛选平台，为其筛选及开发提供新思路。方法:以胶体几丁质-活性艳蓝(CC-RBB)为显色底物，几丁质酶为靶点酶，核黄素为阳性对照，采用紫外分光光度计法，通过反应条件的优化，对水提取制备的276种提取物进行筛选评价。结果:最佳反应条件为:波长595 nm，400 μL 8.0 mg/mL底物，400 μL 2.5 U/mL几丁质酶液，温度40 ℃，反应时间60 min，选定0.1 mg/mL核黄素为阳性对照。276种物质中，几丁质酶抑制率在40.0%~49.9%之间的物质有4种；抑制率在50%~59.9%之间的有3种；抑制率在60%~69.9%之间的有2种，分别为五倍子(68.7％)、夏枯草(61.2％)。酶抑制活性最好的物质是五倍子，对几丁质酶抑制活性＞30.0％的物质进行抗真菌及抗虫活性研究，结果对3种真菌同时都有活性的物质分别为五倍子、苦参和花椒。五倍子水提液质量浓度为400 mg/mL时，杀虫活性为62.0％，半数致死剂量(LD50)为254 mg/mL。结论:成功搭建了几丁质酶抑制剂快速筛选平台，为该抑制剂的新发现提供了可靠的筛选方案。

关键词：几丁质酶; 几丁质酶抑制剂; 筛选平台; 抗真菌; 抗虫

基金资助：国家自然科学基金项目(32160021)；甘肃省重点研发计划项目(22YF7NA176)；甘肃省青年基金计划项目(22JR5RA299)