阻断脑源性神经营养因子-酪氨酸激酶受体B通路后运动训练对脊髓损伤大鼠功能恢复的影响研究

来源：中国康复医学杂志2017年第12期北京时间：

作者：李向哲,王红星,谢财忠,吴勤峰,宋新建,曹雅娜,方 露,丁 洁,王 彤,

单位：南京医科大学第一临床医学院，南京，210029

摘要：目的：探讨阻断脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor，BDNF）-酪氨酸激酶受体B（tropomyosin-related kinase B，TrkB）信号通路后运动训练对脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）大鼠运动功能恢复和突触可塑性的影响。方法：32只雌性SD大鼠被随机分为4组：损伤+PBS组（Sed-PBS组）、运动+PBS组（TT-PBS组）、损伤+TrkB/Fc组（Sed-TrkB/Fc组）及运动+TrkB/Fc组（TT-TrkB/Fc组）。于SCI术前1周进行L3-4鞘内置管。置管1周后使用改良Allen法制作T10不完全性SCI模型。于SCI术后第7天植入渗透压泵，并在Sed-PBS组和TT-PBS组的渗透压泵中灌入0.01M PBS，Sed-TrkB/Fc组和TT-TrkB/Fc组的渗透压泵中灌入TrkB阻滞剂（TrkB/Fc）。SCI后第8天，对TT-PBS组和TT-TrkB/Fc组进行减重平板训练。术后第1天、3天、7天、14天、21天、28天和35天进行BBB评分。实验结束后取材，使用Western Blot和免疫组化染色技术分析检测突触后膜密度蛋白-95（postsynaptic density protein-95，PSD-95）及突触素（synaptophysin，SYP）表达情况。结果：术后14天，TT-PBS组BBB评分明显高于其他3组（P＜0.05）；术后21—35天，TT-PBS组BBB评分显著高于其他3组（P＜0.001）；术后28—35天，TT-TrkB/Fc组BBB评分高于Sed-PBS组及Sed-TrkB/Fc组（P＜0.05）。蛋白免疫印迹结果显示，TT-PBS组PSD-95及SYP相对蛋白表达量显著高于其他3组（P＜0.001）；TT-TrkB/Fc组PSD-95及SYP相对蛋白表达量多于Sed-PBS组和Sed-TrkB/Fc组（P＜0.05）。免疫组化结果显示，与Sed-PBS组、Sed-TrkB/Fc组和TT-TrkB/Fc组相比，TT-PBS组的PSD-95相对蛋白密度明显增高（P＜0.01、P＜0.001、P＜0.01），且SYP相对蛋白密度也明显增高（P＜0.001）；TT-TrkB/Fc组的PSD-95及SYP相对蛋白密度也高于Sed-TrkB/Fc组及Sed-PBS组（P＜0.05）。结论：阻断BDNF-TrkB信号通路可明显抑制运动训练对不完全性SCI大鼠运动功能恢复和腰髓突触标记蛋白表达的促进作用。

关键词：脊髓损伤运动训练脑源性神经营养因子运动功能突触可塑性

基金资助：国家自然科学基金面上项目（81171851）