荧光示踪技术对土壤中诱变菌的生长研究

来源：中国环境科学杂志2017年第1期北京时间：

作者：王婷, 孙红文, 毛洪钧

单位：南开大学环境科学与工程学院, 天津 300071

摘要：采用荧光染料DAPI（4'，6-Diamidino-2-Phenylindole）对外源微生物Bacillus subtilis 38（B38）的DNA分子进行标记，利用荧光示踪技术对外源微生物的生长繁殖进行有效监测.通过筛选DAPI工作液的使用浓度与菌悬液的稀释比例，得出采用0.1 μg/mL浓度的DAPI对稀释106倍的菌悬液进行染色，荧光信号强度适宜，菌体分散度良好，可实现准确计数.采用上述染色条件，对60d内土壤B38菌体数量的变化进行阶段性监测.结果发现，接种后菌体浓度显著增加，平衡后菌体浓度达到（1.05±0.01）×1010cells/mL，与初期施加量相比，增长量达到3个数量级.以上结果表明，采用DAPI染料对外源微生物进行荧光示踪计数，为监测外源微生物的生长繁殖状态提供了一种简便、有效的方法.

关键词：荧光标记,荧光计数,DAPI,细菌,土壤

基金资助：

天津市应用基础与前沿技术研究计划（青年项目）（15JCQNJC15200）；国家科技支撑计划项目（2014BAC23B0205）