活性污泥中一氧化氮还原酶的提取和测定优化

来源：中国环境科学杂志2021年第11期北京时间：

作者：杨睿, 袁林江, 王刚, 袁林杰, 有小龙, 牛晚霞, 于丽萍

单位：1. 西安建筑科技大学环境与市政工程学院, 西安 陕西 710055;2. 陕西省环境工程重点实验室, 西安 陕西 710055;3西北水资源与环境生态教育部重点实验室, 西安 陕西 710055

摘要：通过正交实验，研究了超声破碎法和低温高压破碎法提取一氧化氮还原酶（nitric oxide reductase，nor）的活性，分析了超声强度和次数，破碎压力和次数，裂解液的添加量等因素对于胞内可溶性蛋白和核酸（DNA）的释放与提取nor活性的影响.根据活性污泥中酶的催化特性以及其他实验条件，完善了nor催化活性的测定方法.结果表明超声法提取nor的参数应设定为，超声次数为100次，超声强度为500W，裂解液的添加量为0.1mL.低温高压破碎法提取nor的参数应设定为破碎次数为4次，破碎压力为50MPa，裂解液的添加量为0.1mL.低温高压破碎法下的胞内可溶性蛋白和DNA的释放量与nor的最大催化活性要高于超声破碎法.此外，在nor催化活性的测定方法中，nor活性测定终点时间应为15min.

关键词：氧化亚氮,污泥膨胀,一氧化氮还原酶,提取,测定

基金资助：国家自然科学基金资助项目（51878538）