RP-HPLC法测定β-司他夫定的有关物质

来源：药物分析杂志2015年第1期北京时间：

作者：吴颖1, 张小红1, 耿志旺1, 马玲2, 乐健1, 杨永健1

单位：1. 上海市食品药品检验所, 上海 201203;2. 上海迪赛诺生物医药有限公司, 上海 201203

摘要：目的: 建立了β-司他夫定原料有关物质的RP-HPLC测定方法和水解破坏制备系统适用性试验溶液方法. 方法: 采用Agilent 1100型高效液相色谱仪,使用SUPELCOSIL LC-18-DB(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱,以0.01 mol·L-1醋酸铵溶液-乙腈(96.5:3.5)和0.01 mol·L-1醋酸铵溶液-乙腈(75:25)为流动相,梯度洗脱,检测波长254 nm,柱温25 ℃. 结果: β-司他夫定和4种已知杂质及其他未知杂质均能达到有效分离;经水解破坏产生的α-司他夫定与β-司他夫定的分离度均达2.8;β-司他夫定、胸腺嘧啶、β-胸苷与5-O'-苯甲酰-司他夫定线性范围分别为0.51~26 μg·mL-1(r=1.000)、0.13~27 μg·mL-1(r=1.000)、0.50~25 μg·mL-1(r=1.000)、1.7~6.3 μg·mL-1(r=1.000),已知杂质胸腺嘧啶、β-胸苷与5-O'-苯甲酰-司他夫定的平均加样回收率(n=9)分别为102.8%(RSD=1.5%)、100.6%(RSD=0.9%)、101.9%(RSD=2.1%);β-司他夫定与3种已知杂质的最小检出量均在2.5 ng以下;经水解破坏制备的系统适用性溶液的重复性良好;供试品溶液在4 ℃下的30 h内基本稳定. 结论: 本方法灵敏、准确、可靠,专属性强,可用于β-司他夫定原料的有关物质测定.

关键词：β-司他夫定;杂质检测;胸腺嘧啶;β-胸苷;5-O'-苯甲酰-司他夫定;α-司他夫定;水解破坏产物;有关物质;高效液相色谱,