基于新型衍生化方法的UPLC-HRMS单克隆抗体N-糖基化分析方法

来源：药物分析杂志2015年第6期北京时间：

作者：铁偲, 胡婷, 张金兰

单位：中国医学科学院 药物研究所, 北京100050

摘要：目的: 为了满足单克隆抗体药物N-糖分析的实际需要,建立稳定、灵敏、可靠的单克隆抗体药物N-糖分析的分析方法。方法: 采用全新的肼基衍生化试剂对N-糖进行衍生化,并对衍生化后的N-糖进行超高效液相色谱高分辨质谱分析。采用与开源数据库比对和多级质谱对检测到的N-糖进行初步定性。结果: 新的肼基衍生化分析方法将单克隆抗体药物N-糖分析的灵敏度提高了2~3个数量级,与传统2-氨基苯甲酰胺(2-AB)衍生化相 比,灵敏度也有3倍的提高。新的方法条件温和,保证N-糖结构的完整性,实现了多种不稳定唾液酸修饰N-糖的检出。二级质谱的应用提高了结构分析的效率与针对性。结论: 本文建立了可靠、灵敏、高效的单克隆抗体药物N-糖分析方法,该方法在实际应用中具有极大的应用前景。

关键词：N-糖衍生化;单克隆抗体;肼基衍生化试剂;糖基化;糖蛋白;液质联用;二级质谱,