BRAF基因V600E突变检测的荧光PCR方法的建立

来源：药物分析杂志2015年第8期北京时间：

作者：曲守方1, 于婷1, 郭李平2, 李杰3, 高尚先1, 黄杰1

单位：1. 中国食品药品检定研究院, 北京100050;2. 中国科学院北京基因组研究所, 北京100101;3. 珍奥集团股份有限公司, 大连116635

摘要：目的: 建立检测鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)基因V600E突变的荧光聚合酶链式反应(PCR)方法,为黑色素瘤的药物靶向治疗提供新的基因检测方法。方法: 根据BRAF基因序列V600E位点区域设计特异性的引物和探针,建立该检测方法。检测BRAF基因V600E突变的黑色素瘤临床样本、BRAF基因V600E突变质粒和正常临床样本,评价方法的准确性、灵敏度和特异性。结果: BRAF基因V600E突变的黑色素瘤临床样本在V600E检测体系中具有特异性的扩增;检测灵敏度约为101拷贝/反应;正常临床样本在V600E检测体系中没有特异性的扩增,均是V600E突变阴性。结论: 建立的方法可以用于检测黑色素瘤临床样本中的BRAF基因V600E突变。

关键词：黑色素瘤;鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF);荧光聚合酶链式反应;药物靶向治疗;基因检测,