HPLC法测定CYP450不同亚型探针药物浓度

来源：药物分析杂志2015年第8期北京时间：

作者：杨希, 汪云, 李芹, 焦建杰, 娄建石

单位：天津医科大学基础医学院药理学教研室, 天津300070

摘要：目的: 建立同时测定细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)亚型CYP1A2、2D6、2E1、2C19、2C9和3A4活性的Cocktail探针药物溶液的高效液相色谱(HPLC)检测方法。方法: 分别选择咖啡因、美托洛尔、氯唑沙宗、奥美拉唑、甲苯磺丁脲和咪达唑仑作为CYP1A2、2D6、2E1、2C19、2C9和3A4的特异性探针药物,根据其各自理化特点配制成Cocktail组合探针溶液。使用HPLC-UV梯度洗脱法同时测定该6种探针药物的血药浓度,并对其进行专属性、精密度、准确度、稳定性的验证。结果: 本研究建立的HPLC检测方法,可以同时测定大鼠血浆中6种探针药物的浓度,各探针药物的吸收峰分离完全,无杂质峰干扰。线性关系良好,线性范围为0.2~50 μg·mL-1,最低检测限为0.2 μg·mL-1。日内、日间精密度均小于9%,绝对回收率均大于75%,相对回收率在91%~107%之间,稳定性高,冷冻30 d内的RSD小于10%,室温条件下稳定性RSD小于9%,反复冻融条件下稳定性RSD小于10%。将此方法应用于同时研究大鼠体内该6种酶的活性,证明其具有较好的灵敏度。结论: 经方法学验证,本法可以同时测定6种探针药物咖啡因、美托洛尔、氯唑沙宗、奥美拉唑、甲苯磺丁脲和咪达唑仑的血浆浓度。

关键词：细胞色素P450亚型;高效液相色谱-紫外检测;Cocktail探针药物法;咖啡因;美托洛尔;氯唑沙宗;奥美拉唑;甲苯磺丁脲;咪达唑仑,