雷公藤甲素诱导正常人肝细胞L02的毒性及甘草酸二铵的保护作用

来源：药物分析杂志2015年第9期北京时间：

作者：淡墨, 闻镍, 刘 丽, 李佐刚

单位：中国食品药品检定研究院 国家药物安全评价监测中心, 药物非临床安全评价研究北京市重点实验室, 北京 100176

摘要：目的: 研究雷公藤甲素(triptolide, TP)诱导的正常人肝细胞L02的毒性及甘草酸二铵(diammonium glycyrrhizinate, DG)保护作用。方法: 首先利用CCK-8法测定不同浓度TP对L02的毒性,然后研究DG预处理48 h后对TP诱导L02毒性的影响。利用活性氧(ROS)探针结合高内涵,研究不同浓度DG预处理对TP诱导L02 ROS的影响。进一步利用CYP3A4苯妥因诱导剂和酮康唑抑制剂阐明肝药酶在DG解毒中的作用。结果: 经细胞计数试剂盒(cell counting kit, CCK-8)法测定,L02经TP孵育1、2和4 h时,IC50分别为26、14和8 μmol·L-1。当正常人肝细胞经DG(10、100和1 000 μmol·L-1)预处理48 h后,再与TP共同孵育1 h,DG 10和100 μmol·L-1组的IC50分别升高至58、79 μmol·L-1,而DG 1 000 μmol·L-1组的IC50则降低至18 μmol·L-1。TP诱导L02产生ROS呈现明显的剂量相关性。DG(10和100 μmol·L-1)预处理48 h后可明显降低TP诱导ROS的能力。CYP3A4的诱导剂与DG共同预处理后,可显著性降低TP诱导ROS的能力。CYP3A4的抑制剂和DG共同预处理,反证诱导CYP3A4可能是DG保护作用的机制之一。结论: 本研究提示TP诱导L02的活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平增加,产生毒性作用;低浓度和中浓度DG可以显著性降低TP对L02的毒性,而高浓度DG反而增强TP对L02的毒性。DG诱导CYP3A4上调和降低ROS水平对减轻TP诱导的正常肝细胞毒性起到重要作用。

关键词：雷公藤甲素;甘草酸二铵;正常人肝细胞L02毒性;活性氧;CYP3A4;药物安全性,