LC-MS/MS法测定Beagle犬全血中环孢素A浓度及环孢素微乳制剂的生物等效性研究

来源：药物分析杂志2015年第11期北京时间：

作者：赵萍, 张晞倩, 蒋学华, 王凌

单位：四川大学华西药学院, 成都 610041

摘要：目的:建立液相色谱串联质谱法测定Beagle犬全血中环孢素A的浓度,并考察3种环孢素微乳制剂的生物等效性。方法:全血样品中加入适量内标和氢氧化钠,以乙醚萃取后用API 3000LC-MS/MS仪进行分析。采用CAPCELLPAK(C18)(2.0 mm×50 mm,5μm)色谱柱,以水(5 mmol·L-1甲酸铵)为流动相A,甲醇-乙腈(1:1,含5 mmol·L-1甲酸铵)为流动相B,以0.4 mL·min-1的流速进行梯度洗脱(0~0.8 min,60%B;0.8~1.3 min,60%B→100%B;1.3~2.5 min,100%B;2.5~3.7 min,60%B),柱温65℃;质谱采用多反应离子监测(MRM)的扫描模式,以电喷雾离子源(ESI)在正离子电离模式下进行测定,选择性监测质荷比(m/z)为1220.2/1202.9(环孢素A)、1234.3/1216.9(环孢素D,内标)。结果:本方法的线性范围为20.16~2016 ng·mL-1;最低定量浓度为:20.16 ng·mL-1。日内、日间精密度均小于7.1%,准确度在92.9%~108.2%之间,提取回收率为63.8%~68.3%,稳定性考察结果良好。以AUC0-t计算,受试制剂的相对生物利用度为95.42%~100.10%;以AUC0-∞计算,受试制剂的相对生物利用度为95.82%~99.14%。剂量矫正后Cmax和AUC0-∞的90%置信区间(CI)均在80%~125%范围内,2种口服液和1种软胶囊制剂生物等效。结论:本法经方法学验证,适用于测定Beagle犬全血中环孢素A浓度及其生物等效性研究。

关键词：环孢素A;微乳制剂;剂量矫正;生物等效性;液相色谱质谱联用,