多重PCR-毛细管电泳法检测Y染色体微缺失

来源：药物分析杂志2016年第2期北京时间：

作者：曲守方1, 于婷1, 林斯里2, 滕乐2, 高尚先1, 黄杰1

单位：1. 中国食品药品检定研究院, 北京 100050;2. 亚能生物技术(深圳)有限公司, 深圳 518102

摘要：目的:对多重PCR-毛细管电泳法检测Y染色体微缺失进行评价。方法:选择Y染色体无精子因子(AZF)区域的15个序列标签位点(STS),设计特异性的引物,分成4个不同的多重PCR体系。首先提取临床外周全血样本的基因组DNA。将样本的DNA分别加入到4个不同的PCR体系中进行扩增。将获得的目的DNA片段进行毛细管电泳,并根据预设的AZF marker计算出各检测位点的碱基长度,然后分析临床样本的Y染色体微缺失情况。结果:该方法能够准确检测出临床样本的Y染色体AZF a区域缺失、AZF b区域缺失和AZF c区域缺失等缺失;检测限约为3 ng·反应-1;正常男性临床样本的检测结果是均未发生Y染色体微缺失;在210例无精子症和少精子症患者中,该方法能够准确检测出19例AZF区域微缺失,包括AZF a区域缺失1例,AZF b区域缺失2例,AZF c区域缺失13例,AZF bc区域缺失1例和AZF abc区域缺失2例。结论:多重PCR-毛细管电泳法具有很好的临床适用性,在临床上可以用于Y染色体微缺失检测,为临床遗传咨询提供建议。

关键词：无精子因子;Y染色体微缺失;多重聚合酶链式反应;DNA检测;毛细管电泳法;辅助生殖,