建立HPLC法同时测定复方黑骨藤中9种有效成分的含量

来源：药物分析杂志2016年第7期北京时间：

作者：徐艳1, 李琪1,2, 姚瑾1, 李慧敏1, 张晓峰1, 张宏1,2

单位：1. 四川师范大学生命科学学院, 成都 610101;2. 四川师范大学植物资源应用与开发研究所, 成都 610101

摘要：目的：建立HPLC 法同时测定复方黑骨藤中落干酸、6'-O-β-D- 葡萄糖基龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、龙胆苦苷、獐芽菜苷、杠柳苷、延胡索乙素、四氢小檗碱、延胡索甲素9 种有效成分的含量。方法：采用KromasilC18 色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈（A）-0.05% 三乙胺+ 乙酸水溶液（B，pH=6.0）为流动相，梯度洗脱（0~5 min，5%A → 8%A；5~5.5 min，8%A → 11%A；5.5~20 min，11%A；20~30 min，11%A → 30%A；30~40min，30%A → 40%A；40~42 min，40%A → 55%A；42~53 min，55%A → 75%A），流速1.2 mL·min-1，柱温25 ℃，检测波长为206 nm（延胡索乙素、四氢小檗碱、延胡索甲素）、225 nm（落干酸和杠柳苷）、243 nm（獐牙菜苦苷和獐牙菜苷）和275 nm（6'-O-β-D- 葡萄糖基龙胆苦苷和龙胆苦苷），进样量10 μL。结果：落干酸、6'-O-β-D- 葡萄糖基龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、龙胆苦苷、獐芽菜苷、杠柳苷、延胡索乙素、四氢小檗碱和延胡索甲素的质量浓度在一定范围内，与峰面积呈良好的线性关系；平均回收率（n=6）分别为92.7%、90.9%、91.2%、94.9%、97.4%、94.6%、96.1%、90.9% 和104.4%，RSD 分别为2.1%、1.3%、1.1%、1.6%、0.7%、0.6%、1.8%、2.0% 和1.4%；样品中上述9 种成分含量范围分别为3.464~3.535、1.133~1.178、0.373~0.382、13.598~14.142、0.109~0.112、0.499~0.510、0.114~0.119、0.027~0.028 和0.163~0.174 mg·g-1。结论：经方法学验证，本方法可用于黑骨藤复方药物中9 种有效成分的分析和含量测定，为复方黑骨藤药物的质量控制奠定基础。

关键词：复方黑骨藤;黑龙骨;秦艽;元胡;落干酸;6'-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷;獐牙菜苦苷;龙胆苦苷;獐牙菜苷;杠柳苷;延胡索乙素;四氢小檗碱;延胡索甲素;HPLC,