甲型H1N1流感重组病毒模型的建立及应用

来源：药物分析杂志2016年第7期北京时间：

作者：吴彦霖, 罗剑, 张媛, 刘倩, 高华

单位：中国食品药品检定研究院, 北京 100050

摘要：目的：针对流感病毒感染宿主机体的作用机制，建立以甲型H1N1流感A/California/04/2009（H1N1）为靶点的重组病毒模型，并对其应用进行探索。方法：通过将表达流感病毒血凝素蛋白HA、神经氨酸酶NA 及敲除外壳基因、复制基因并带有荧光素酶报告基因的HIV-1 质粒共转染至293T 包装细胞，产生以HA[A/California/04/2009（H1N1）]和NA[A/California/04/2009（H1N1）]为膜蛋白，HIV-1（pNL4-3.Luc.R-E-）为核心的重组病毒。通过该重组流感病毒模型评价阳性对照化合物（奥斯他韦、奥斯他韦酸）、中和血清以及板蓝根药材提取液对重组病毒活性的抑制作用。结果：奥司他韦、奥司他韦酸抑制重组病毒pNL+HA04+NA04 的IC50为1.07×10-8 mol·L-1 和1.82×10-9 mol·L-1；中和血清的IC50为1:320~1:640；中药板蓝根提取液的IC50 为1.91×10-5 g·mL-1。结论：奥斯他韦、奥斯他韦酸、中和血清及板蓝根提取液对于重组病毒的活性有抑制作用，提示所构建的重组病毒模型可用于上述作用机制药物的筛选和评价。

关键词：重组病毒;H1N1流感;板蓝根药材提取液;奥斯他韦;达菲;奥斯他韦酸;中和血清;血凝素;神经氨酸酶;抗流感病毒活性评价,