BCR-ABL融合基因检测试剂盒质控品的建立

来源：药物分析杂志2016年第9期北京时间：

作者：曲守方1, 于婷1, 张娟丽2, 胡小许3, 郭李平3, 赵金银4, 高尚先1, 黄杰1

单位：1. 中国食品药品检定研究院, 北京 100050;2. 河南省医疗器械检验所, 郑州 450003;3. 中国科学院北京基因组研究所, 北京 100101;4. 大连晶泰医学检验所, 大连 116635

摘要：目的：建立BCR-ABL融合基因质控品，评价人类BCR-ABL融合基因突变检测试剂盒的性能。方法：根据人类BCR-ABL e1a2和e14a2型融合基因mRNA序列，设计覆盖断裂点序列，合成目的融合基因序列。用限制性内切酶BglⅡ和HindⅢ对含有目的融合基因的质粒和表达载体进行酶切，连接酶切产物。将连接产物转化DH5α感受态细胞，筛选单个阳性菌落进行验证。将正确的单个菌落进行超声诱导，制备假病毒溶液。用荧光逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法对假病毒溶液提取的RNA进行检测。结果：PCR结果和测序结果表明成功构建人类BCR-ABL融合基因e1a2和e14a2型假病毒质粒；荧光RT-PCR结果表明构建的e1a2和e14a2型假病毒质粒能够表达目的RNA，并且能被市售试剂盒正确检出，可以作为RNA质控品。结论：本研究建立人类BCR-ABL融合基因RNA质控品，用于评价BCR-ABL融合基因突变检测试剂盒的性能，为BCR-ABL融合基因相关白血病的临床诊断及靶向治疗提供指导。

关键词：靶向药物;分子靶向治疗;慢性粒细胞白血病标志物;埃布尔森小鼠白血病病毒癌基因同源物1;BCR-ABL;融合基因;RNA检测;荧光逆转录-聚合酶链反应;基因检测试剂;标准物质研究,