二黄汤半仿生法提取液指纹图谱归属研究

来源：药物分析杂志2016年第9期北京时间：

作者：王京龙1, 郑丹丹1, 孙秀梅2, 王英姿3, 张超2, 于定荣4, 王占一1

单位：1. 枣庄学院生命科学学院, 枣庄 277160;2. 山东中医药大学药学院, 济南 250355;3. 北京中医药大学药学院, 北京 100029;4. 中国中医科学院中药研究所, 北京 100700

摘要：目的：对二黄汤方药半仿生法（SBE法）≤1 000 Da提取液的指纹图谱各特征峰的来源进行归属研究。方法：采用SBE法分别制备二黄汤全方和各单味药黄芩、黄连、甘草的提取液，绘制相应的HPLC指纹图谱，通过比对，确定其特征峰的来源；通过对照品比对，鉴定部分特征峰的成分。色谱条件：采用Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，0.02 mol·L-1乙酸铵溶液（冰乙酸调pH 4.0）（A）-乙腈（B）为流动相，梯度洗脱，流速0.5 mL·min-1，检测波长265 nm，柱温25 ℃，进样量20 μL。结果：二黄汤的SBE法≤1 000 Da提取液的HPLC指纹图谱有32个特征峰，其中峰9、11、13、16、17、25、26、27、30、31来自黄芩，峰15、20、21来自黄连，峰3、10、12、23、24、32来自甘草，峰2、18、19来自黄芩、黄连和甘草，峰14、28、29来自黄芩和甘草，峰1、4、5、6、7、8、22来自黄连和甘草。以保留时间和紫外吸收曲线为判断依据，进行对照品比对，鉴别出甘草苷、黄芩苷、巴马汀、小檗碱、甘草素、甘草酸、黄芩素、甘草次酸共8个已知成分，其中峰22是含小檗碱和甘草素的混合峰，与归属结果相同。结论：二黄汤SBE法提取液指纹图谱的建立符合要求，归属研究方法合理。与对照品比对，二黄汤SBE法≤1 000 Da提取液中各特征峰的归属结果准确，可为特征峰的成分鉴定和谱效关系研究提供依据。

关键词：二黄汤;黄芩;黄连;甘草;甘草苷;黄芩苷;巴马汀;小檗碱;甘草素;甘草酸;黄芩素;甘草次酸;中药复方;HPLC指纹图谱;特征峰;归属;成分鉴定;谱效关系;半仿生法(SBE法),