《药物分析杂志》发表论文赏析
作者:符伟玉, 曾振飞, 兰柳波, 吴科锋
单位:1. 广东医学院生物化学与分子生物学研究所, 湛江 524023;2. 广东天然药物研究与开发重点实验室, 湛江 524023
摘要:目的:利用小干扰RNA技术沉默Gα13基因的表达,探讨其对人卵巢癌HO-8910PM细胞生长与转移的影响。方法:以Shuttle Vector 1.0-CMV为载体,构建针对Gα13的shRNA重组表达质粒;转染人卵巢癌细胞HO-8910PM,利用RT-PCR和Western Blot分别检测Gα13基因mRNA和蛋白的表达水平。体外通过MTT法、Transwell小室、Matrigel胶模型、流式细胞术,观察Gα13被沉默后对人卵巢癌HO-8910PM细胞生长与侵袭转移的影响;放射自显影方法分析Rho GTPases活性。结果:RT-PCR和Western Blot结果显示,Shuttle Vector 1.0-CMV Gα13 B siRNA转染组Gα13基因的表达水平被有效抑制。与对照组相比,Shuttle Vector 1.0-CMV Gα13 B siRNA转染组的细胞侵袭、迁移力明显下降(P<0.01),细胞被阻滞在g0/G1期,且膜上Rho GTPases与GTP结合活性明显下降。结论:靶向Gα13的重组shRNA质粒能够有效抑制Gα13基因在HO-8910PM细胞中的表达,并能降低HO-8910PM细胞侵袭迁移的能力,其机制可能与降低细胞膜上Rho GTPases活性有关,可为卵巢癌的靶向治疗提供参考。<!--0.01),细胞被阻滞在g<sub-->
关键词:lysophosphatidic acid; RNA interference; migration and invasion; gene expression; ovarian cancer,