UPLC-MS/MS法同时测定人血浆和脑脊液中3种抗神经精神性狼疮药物的浓度

来源：药物分析杂志2017年第11期北京时间：

作者：郑昕, 王维聪, 胡蓓, 江骥, 张奉春

单位：1. 中国医学科学院 北京协和医院 临床药理中心, 北京 100032;2. 中国医学科学院 北京协和医院 免疫科, 北京 100032

摘要：目的：建立同时检测人血浆、脑脊液中甲泼尼龙（methylprednisolone，MP）、环磷酰胺（cyclophnosphamide，CP）和甲胺喋呤（methotrexate，MTX）的UPLC-MS/MS法，初步评价了3种药物在神经精神性狼疮（NPSLE）患者中的血脑屏障穿透率。方法：以4-氨基苯乙酮为内标物，对血浆及脑脊液样品进行蛋白沉淀处理后，采用UPLC-MS/MS法同时检测各物质。色谱条件：采用ACQUITY UPLC CSH色谱柱（2.1 mm&amp;#215;50 mm，1.7 μm），以含0.1%甲酸的水溶液及含0.1%甲酸的乙腈为流动相，梯度洗脱，流速0.4 mL&amp;#183;min-1，柱温30℃；质谱条件：电喷雾离子源（ESI），正离子和负离子扫描，采用多反应监测（MRM）的质谱扫描方式进行测定。MP为负离子扫描（m/z 373.1→343.2）；CP及MTX为正离子扫描（m/z 261→233，m/z 455→308）；内标4-氨基苯乙酮为正离子扫描（m/z 136.0→93.8）。本实验考察了3个化合物血浆样品制备后自动进样器放置的稳定性和稀释可靠性；以及脑脊液样品室温放置、制备后自动进样器放置稳定性和稀释可靠性。结果：血浆中3种药物标准曲线浓度范围分别为MP 0.5~500 ng&amp;#183;mL-1，CP 0.5~200 ng&amp;#183;mL-1，MTX 0.5~500 ng&amp;#183;mL-1；脑脊液中3个药物标准曲线浓度范围均为0.5~200 ng&amp;#183;mL-1。血浆和脑脊液中化合物的批内、批间精密度（RSD）均&lt;15%，相对误差均在±15%范围内。基质效应、萃取回收率和稳定性也分别进行了验证。且样本储存和处理过程中，3个化合物能够保持稳定。本方法用于检测使用mp，cp和mtx治疗的npsle患者的血浆与相应时间的脑脊液样本，用于评价3种药物的血脑屏障穿透率。结论：本方法简便、灵敏、准确，适用于3种药物的血脑屏障穿透率研究，且在方法应用中验证了临床方案的合理性。<!--15%，相对误差均在&#177;15%范围内。基质效应、萃取回收率和稳定性也分别进行了验证。且样本储存和处理过程中，3个化合物能够保持稳定。本方法用于检测使用mp，cp和mtx治疗的npsle患者的血浆与相应时间的脑脊液样本，用于评价3种药物的血脑屏障穿透率。<b-->

关键词：methy prednisdone(MP); cyclophnosphamide(CP); methotrexate(MTX); UPLC-MS/MS; plasma; cerebrospinal fluid; blood-brain barrier penetration rate,