HPLC梯度洗脱法测定头孢匹胺钠中有关物质

来源：药物分析杂志2017年第11期北京时间：

作者：马春华, 杨晨, 任凤英, 陈林, 杨红, 杨庆云

单位：1. 中国医学科学院药物研究所, 北京 100050;2. 抗生素研究与再评价四川省重点实验室, 成都大学四川抗菌素工业研究所, 成都 610052

摘要：目的：建立用于检测头孢匹胺钠有关物质的高效液相色谱梯度洗脱法，并对其中关键的有关物质I进行结构鉴定。方法：采用ZORBAX SB-C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相A为0.03 mol·L-1磷酸二氢钾（2 mol·L-1 NaOH调至pH7.5），流动相B为乙腈；柱温为35℃；检测波长为254 nm；流速为1.0 mL·min-1；液质联用方法采用XDB-C18柱（4.6 mm×50 mm，1.8 μm）色谱柱，以0.01 mol·L-1甲酸铵缓冲溶液（pH6.5未调）-乙腈（90∶10）为流动相，检测波长为254 nm，流速为0.4 mL·min-1，柱温为30℃。采用电喷雾ESI离子源，检测模式为ESI（+），干燥气流速为10 L·min-1；干燥气温度为340℃，喷雾器为275.8 kPa。结果：头孢匹胺钠主峰与其相关物质之间分离良好，在1.31~41.98 mg·mL-1范围内头孢匹胺钠呈良好的线性关系（R2=1.000），方法的定量限为2.6 ng，检测限为0.8 ng。采用LC-MS方法鉴定其中有关物质I的结构为头孢匹胺钠的异构体，并用合成方法确证了结构的正确性，其7位侧链手性原子由R型改变为S型。结论：本方法快速准确，起始原料、中间体与主峰，起始原料和中间体之间分离良好，优于现行标准方法，可用于头孢匹胺钠的有关物质检测，为现行方法的有力补充。

关键词：cephalosporin antibiotics; cefpiramide sodium; impurity; isomer; LC-MS; structure identification,