独活的HPLC指纹图谱及4个香豆素类成分的测定

来源：药物分析杂志2018年第6期北京时间：

作者：王计瑞, 谭均, 李隆云, 刘金亮, 张继芬

单位：1. 重庆市中药研究院, 重庆市中药良种选育与评价工程技术研究中心, 重庆市中药资源学重点实验室, 重庆 400065;2. 中国中医科学院 中药资源中心 重庆分中心, 重庆 400065;3. 西南大学 药学院, 重庆 400716

摘要：目的：建立独活HPLC指纹图谱并测定独活中二氢欧山芹醇、蛇床子素、异欧前胡素、二氢欧山芹醇当归酸酯的含量，为独活的质量控制提供参考。方法：采用SWELL ChromplusTM C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以乙腈（A）-0.2%醋酸水溶液（B）为流动相，梯度洗脱（0~5 min，15%→20% A；5~20 min，20%→27% A；20~45 min，27% A；45~55 min，27%→30% A；55~56 min，30%→41% A；56~60 min，41% A；60~70 min，41%→50% A；70~90 min，50%→55% A；90~95 min，55%→15% A；95~100 min，15% A），流速1.0 mL·min-1，检测波长325 nm，柱温25℃。采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"建立指纹图谱并进行相似度评价，利用SPSS 20.0软件进行聚类分析。对二氢欧山芹醇、蛇床子素、异欧前胡素和二氢欧山芹醇当归酸酯的含量测定进行方法学考察。结果：建立了独活的指纹图谱，标定了21个共有峰，18批独活药材与对照图谱的相似度均≥ 0.85，聚类分析将其分为3类。二氢欧山芹醇、蛇床子素、异欧前胡素和二氢欧山芹醇当归酸酯线性范围分别为2.250~36.000、34.500~552.000、1.375~22.000和9.375~150.000 μg·mL-1，线性关系良好（r ≥ 0.999 7）；重复性试验RSD<2%，平均加样回收率在94.1%~100.6%之间。18批样品中二氢欧山芹醇、蛇床子素、异欧前胡素和二氢欧山芹醇当归酸酯的含量分别为0.009 3%~0.110 1%，0.498 9%~1.664 1%，0.007 1%~0.045 0%和0.065 4%~0.569 0%。结论：独活指纹图谱专属性强，结合4个香豆素类成分的含量测定可较全面控制独活的质量。

关键词：Angelica Pubescens Radix; fingerprint; clustering analysis; columbianetin; osthole; isoimperatorin; columbianadin; content determination,