骨形态发生蛋白-2单克隆抗体的制备及评价

来源：药物分析杂志2018年第8期北京时间：

作者：刘启省, 张东刚, 南南, 王金恒, 陈亮, 徐丽明

单位：1. 烟台正海生物科技股份有限公司, 烟台 264000;2. 中国食品药品检定研究院, 北京 102629;3. 北京三药科技开发公司, 北京 100176

摘要：目的：制备骨形态发生蛋白-2（BMP-2）单克隆抗体，并对其进行评价。方法：用重组人源BMP-2蛋白（rhBMP-2）对小鼠进行免疫；确认小鼠血清BMP-2抗体检测阳性后，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞按3∶1的比例融合得到杂交瘤细胞株；用间接竞争ELISA法筛选BMP-2阳性单克隆杂交瘤细胞；用常规Protein G进行纯化得到BMP-2单克隆抗体，并对其纯度、表位构相，特异性进行评价。结果：成功制备BMP-2单克隆抗体，其亚型为IgG2a，κ，纯化后的SDS-PAGE纯度大于90%。评价结果表明，本课题组研制的BMP-2抗体与rhBMP-2的结合位点为非线性表位，且特异性优于市售抗体，与BMP家族的BMP-4、BMP-5、BMP-7无交叉反应。结论：本课题组研制的单克隆抗体特异性好，效价高，可用于建立酶联免疫方法，检测骨修复材料中BMP-2含量。

关键词：monoclonal antibody; bone morphogenetic protein-2 (BMP-2); recombined human BMP-2 (rhBMP-2); epitope conformation; specificity; bone graft material; BMP-2 content,