抑制性ELISA法检测药械组合产品中rhBMP-2的含量

来源：药物分析杂志2018年第8期北京时间：

作者：陈亮, 刘启省, 苑晓佩, 张东刚, 徐丽明

单位：1. 中国食品药品检定研究院, 北京 102629;2. 烟台正海生物科技股份有限公司, 烟台 264000

摘要：目的：建立抑制性酶联免疫吸附分析法检测药械组合产品（骨植入物）中rhBMP-2的含量。方法：将含rhBMP-2的骨植入物匀浆后，先与rhBMP-2抗体溶液反应，再将剩余抗体与包被的rhBMP-2进行显色反应，骨修复材料对显色反应的抑制程度与其所含的rhBMP-2含量成正比，从而能准确测定组合产品中rhBMP-2的含量。通过对rhBMP-2包被浓度、rhBMP-2抗体浓度的优化，建立该方法的基本实验条件；并对检测方法的标准曲线范围、检测回收率、精密度、可重复性进行验证；用该方法对复合不同rhBMP-2含量的骨修复材料进行检测。结果：建立的抑制性酶联免疫吸附分析方法标准曲线线性良好（R2=0.998），质量浓度范围为0.078~10 μg·mL-1，检测回收率均在理论值±20%范围内，实验内精密度和实验间精密度验证数据RSD均小于15%，不同操作人员对检测结果无显著影响。用该方法实现了对rhBMP-2含量分别5、10、50 μg·g-1的骨修复材料的准确检测。结论：本研究建立了抑制性酶联免疫吸附分析方法，弥补了仅通过工艺参数计算间接确定药械组合产品中rhBMP-2含量的不足，实现了药械组合产品中rhBMP-2含量的直接准确检测。

关键词：combination products; recombined human BMP-2 (rhBMP-2); inhibition ELISA; rhBMP-2 content; bone graft,