液质联用对重组胰高血糖素样肽-1-Fc融合蛋白中的制品相关蛋白进行定性定量分析

来源：药物分析杂志2018年第11期北京时间：

作者：陶磊, 刘周阳, 韩春梅, 史新昌, 聂爱英, 范文红, 饶春明

单位：1. 中国食品药品检定研究院, 卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室, 北京 100050;2. 沃特世科技有限公司, 上海 201206

摘要：目的：对重组胰高血糖素样肽-1-Fc融合蛋白（rGLP-1-Fc）的制品相关蛋白进行定性及定量分析。方法：利用液质联用法，对rGLP-1-Fc原液中制品相关蛋白的修饰类型进行鉴定；通过胰蛋白酶酶切液质肽图的方法，对修饰位点进行鉴定；采用反相超高效液相色谱法，测定3批原液中制品相关蛋白的比例。结果：该蛋白原液中主要存在3种制品相关蛋白；液质联用检测结果显示：1种为氧化及糖化的修饰产物，另外2种为一条二硫键解链导致的变异体；液质肽图分析发现氧化及糖化发生在第28位赖氨酸残基；对3批原液进行了检测，3种制品相关蛋白的平均含量分别为（2.37±0.04）%、（9.07±0.20）%和（4.03±0.07）%。结论：利用液质联用技术对rGLP-1-Fc原液中的制品相关蛋白进行了初步的定性、定量分析，测定结果可为同类产品的制品相关蛋白分析提供技术支持。

关键词：recombinant GLP-1-Fc; fusion protein; product-related proteins; glycation; ultra performance liquid chromatography-mass spectrometry (UPLC-MS),