采用柱前衍生化法研究康复新液不同制备环节中氨基酸成分轮廓差异

来源：药物分析杂志2018年第12期北京时间：

作者：李奇娟, 张彩丽, 王战国, 胡慧玲

单位：1. 成都中医药大学药学院, 中药材标准化教育部重点实验室, 四川省中药资源系统研究与开发利用重点实验室省部共建国家重点实验室培育基地, 成都 611137;2. 成都大学医学院代谢组学协同创新实验室, 羌医药标准研究推广基地暨协同创新中心, 成都 610106

摘要：目的：采用柱前衍生化法及主成分分析（principal component analysis，PCA）、偏最小二乘法-判别分析（partial least square-discriminant analysis，PLS-DA）等多变量数据分析方法动态分析测定不同批次美洲大蠊药材以及由其所制备的提取物和制剂康复新液中12种游离氨基酸含量，筛选出导致差异的特征性氨基酸成分。方法：采用1% FDNB-乙腈溶液进行柱前衍生化；色谱条件：色谱柱为Kromasil C18色谱柱（250 mm&amp;#215;4.6 mm，5.0 μm），流动相A为20 mmol&amp;#183;L-1乙酸铵-0.4%乙酸水溶液，流动相70%乙腈，梯度洗脱（0~5 min，70% A；5~8 min，70% A→68.5% A；8~12 min，68.5% A→67% A；12~16 min，67% A→65% A；16~17 min，65% A→62% A；17~18 min，62% A→61% A；18~23 min，61% A→59% A；23~24 min，59% A→49% A；24~31 min，49% A→40% A；31~33 min，40~35% A；33~35 min，35% A→30% A；35~37 min，30% A；37~38 min，30% A→70% A；38~40 min，70% A），流速1 mL&amp;#183;min-1，检测波长360 nm，柱温30℃，进样量10 μL。结果：12种氨基酸在40 min内均能得到较好的分离，r=0.999 1~0.999 9（n=3），平均回收率为90.2%~111.8%，RSD为0.57%~2.6%；制剂中精氨酸（Arg）含量与药材、提取物相较具有统计学差异性（P&lt;0.05）；通过pls-da和各变量重要性因子分析（vip）表明，牛磺酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、谷氨酰胺对药材、提取物、制剂的质量贡献较为明显。结论：通过氨基酸含量的测定可将美洲大蠊药材与提取物、制剂样品区分开，提取物与制剂样品之间含量存在的差异较小，表明康复新液制备工艺较为稳定，其中牛磺酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、谷氨酰胺以及精氨酸为康复新液质量控制标志物。<!--0.05）；通过pls-da和各变量重要性因子分析（vip）表明，牛磺酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、谷氨酰胺对药材、提取物、制剂的质量贡献较为明显。<b-->

关键词：Kangfuxinye; amino acids; HPLC; principal component analysis; partial least square-discriminant analysis; chemical profile difference,