成像毛细管等电聚焦电泳分析单克隆抗体电荷异质性的方法学验证及系统适用性对照品的制备

来源：药物分析杂志2019年第1期北京时间：

作者：武刚, 于传飞, 王文波, 李萌, 王兰

单位：中国食品药品检定研究院 单克隆抗体产品室 卫生部生物技术产品检定方法及标准化重点实验室, 北京 102629

摘要：目的：采用成像毛细管等电聚焦电泳（imaging capillary electrofocusing electrophoresis，iCIEF）分析单抗的电荷异质性，组织国内多家质控实验室对该方法进行验证；制备用于iCIEF法的系统适用性对照品。方法：邀请19个质控实验室，应用3种品牌（4种型号）的iCIEF设备进行方法学的预验证，确定该方法的关键试剂、仪器参数设置、数据分析要点等；依据ICH_Q2_R1指导原则、2015年版《中华人民共和国药典》（简称《中国药典》）通则9101制定方法学验证方案，邀请11个质控实验室参加验证；制备基于iCIEF法的系统适用性对照品并利用SEC-HPLC、IEC-HPLC、非还原CE-SDS进行稳定性评价。结果：预验证结果显示：等电点标记物（pI Marker）为关键试剂；不同品牌、型号的iCIEF检测设备参数设置无需统一；数据处理可采用自动积分、手动积分相结合的形式。验证结果：完成了该方法的特异性、准确度、精密度、线性及其范围、耐用性、定量下限的评价；制备了iCIEF法的系统适用性对照品，并进行了加速及长期稳定性评价，制定了相应的合格标准。结论：首次组织了iCIEF的方法学验证，为《中国药典》标准提高提供方法学验证依据，为该方法制备了系统适用性对照品。

关键词：单克隆抗体;电荷异质性;系统适用性对照品;成像毛细管等电聚焦电泳（iCIEF）;方法学验证,