应用ELISA检测注射用重组人促血小板生成素模拟肽-Fc融合蛋白中卡那霉素残留量

来源：药物分析杂志2019年第2期北京时间：

作者：常翠云, 崔颖, 李晓然, 齐连权

单位：北京泰德制药股份有限公司生物制品部, 北京 100176

摘要：目的：建立灵敏度更高的ELISA方法检测卡那霉素残留量并进行方法学验证，用于重组生物制品的质量控制。方法：采用直接竞争ELISA方法，样品中残留的卡那霉素将和酶标抗原竞争酶标板上预包被的卡那霉素抗体，用3，3，5，5-四甲基联苯胺（TMB）底物显色，样品吸光值与残留卡那霉素的含量成负相关，用酶标仪进行检测并用Ridasoft Win分析软件进行分析。结果：此方法灵敏度高，在0.2~3.0 ng·mL-1范围内spline拟合良好，且平行复孔RSD小于10%；方法精密度良好，加标回收率在80%~120%之间。应用该方法对1批注射用重组人促血小板生成素模拟肽-Fc融合蛋白（简称TMP-Fc）成品的卡那霉素残留量进行测定，结果表明，每瓶TMP-Fc（250 μg）卡那霉素残留量小于0.2 ng。结论：该方法具有灵敏度高、操作便捷、检测迅速等特点，可以用于重组生物制品中卡那霉素残留量的质量控制。

关键词：ELISA;卡那霉素;残留量;重组生物制品;质量控制;TMP-Fc,