野艾蒿总黄酮对HepG2细胞脂质代谢中AMPK蛋白相关信号转导通路的作用研究

来源：药物分析杂志2019年第8期北京时间：

作者：李洋, 周成江

单位：1. 包头医学院, 包头 014060;2. 内蒙古林业总医院, 牙克石 022150

摘要：目的：通过研究野艾蒿总黄酮对腺苷酸蛋白活化激酶（AMPK）相关信号转导通路的影响，从而探明其调节HepG2细胞脂质代谢过程中存在的作用机制。方法：以HepG2细胞作为研究对象建立脂质堆积模型，将实验细胞分为对照组和药物组，Western blot检测经药物作用后该模型中乙酰辅酶A羧化酶（acetyl-CoA carboxylase，ACC）磷酸化表达情况以及AMPK上游钙调蛋白依赖性激酶（Ca2+ dependentprotein kinase kinase，CaMKK）活性改变对药物激活AMPK的影响；超高效液相色谱法检测野艾蒿总黄酮激活AMPK对HepG2细胞内AMP/ATP水平的影响。结果：（1）油红染色结果显示，野艾蒿总黄酮能够通过AMPK来促进HepG2细胞脂质代谢。（2）Western blot结果显示，药物组与对照组相比，ACC的磷酸化表达均具有显著性差异（P<0.05）且表达水平升高，但该过程可以被AMPK抑制剂所阻断。（3）野艾蒿总黄酮在CaMKK特异性抑制剂作用下仍能够上调HepG2细胞中AMPK的磷酸化表达。（4）超高效液相色谱结果显示药物组与对照组相比，一磷酸腺苷（adenosine monophosphate，AMP）、二磷酸腺苷（adenosine diphosphate，ADP）、三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）含量及AMP/ATP含量比值均未发生显著变化，差异无统计学意义（P>0.05）。结论：野艾蒿总黄酮能够依靠药物-AMPK-ACC这一调脂通路来影响HepG2细胞脂质代谢，但其激活AMPK途径与CaMKK活性和AMP/ATP含量比值变化无关。

关键词：野艾蒿;总黄酮;腺苷酸蛋白活化激酶;活性分析;乙酰辅酶A羧化酶;钙调蛋白依赖性激酶;AMP/ATP,