SEC-HPLC法测定溶瘤腺病毒注射液的纯度

来源：药物分析杂志2020年第1期北京时间：

作者：李永红, 韩春梅, 毕华, 陶磊, 李响, 饶春明

单位：中国食品药品检定研究院 卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室, 北京 100050

摘要：目的： 建立检测溶瘤腺病毒注射液纯度的分子排阻高效液相色谱法（SEC-HPLC法）。方法： 采用XBridge BEH SEC分析柱和Waters 2695/2489高效液相色谱系统，以含150 mol·L-1氯化钠的磷酸盐缓冲溶液（pH 7.0）为流动相进行等度洗脱，流速0.5 mL·min-1，检测波长260 nm，采用峰面积归一法检测溶瘤腺病毒注射液纯度，并对方法的专属性、线性、重复性、中间精密度、检测下限和定量下限等指标进行考察。结果： 空白溶剂无干扰峰出现；未经纯化和热处理的溶瘤腺病毒溶液中溶瘤腺病毒峰与其他杂质峰分离度均大于2.0；溶瘤腺病毒的进样量在2×108~2×1010病毒颗粒（VP）范围内，浓度与吸收峰的线性关系良好（R2=0.998 5）；6次进样测得的峰面积的RSD为0.78%；中间精密度试验的RSD为4.7%；检测下限为2.3×106 VP，定量下限为6.7×106 VP。3批溶瘤腺病毒注射液的纯度分析结果分别为99.84%、99.80%、99.64%。结论： SEC-HPLC法可用于检测溶瘤腺病毒注射液的纯度。

关键词：溶瘤腺病毒;基因治疗产品;质量控制;纯度;分子排阻高效液相色谱法,