改构溶瘤腺病毒DNA序列分析研究

来源：药物分析杂志2020年第1期北京时间：

作者：刘兰, 史新昌, 黄永兴, 李永红, 饶春明

单位：1. 中国食品药品检定研究院 卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室, 北京 100050;2. 赛默飞北京环贸实验室, 北京 100013

摘要：目的： 以改构的溶瘤腺病毒制品为研究对象，探讨DNA测序技术在基因治疗制品质量控制和质量标准制定中的作用。方法： 提取并纯化一种改构溶瘤腺病毒制品的基因组DNA，对其基因组关键区段、非关键区段进行测序分析，发现变异体后应用第一代和第二代DNA测序技术进行进一步分析和检测。结果： 关键区段DNA序列与理论序列一致；非关键区段DNA序列与理论序列相似度大于99.9%；发现1个高变异区段，进一步分析结果显示：缺失1个胞嘧啶（C）的变异体占比5/9（克隆/克隆）；缺失2个胞嘧啶（C）的变异体占比1/9（克隆/克隆）；插入1个胞嘧啶（C）的变异体占比1/9（克隆/克隆）。结论： 第一代和第二代DNA测序技术虽然各有优缺点，但只要相互组合使用得当，仍然可较好地用于基因治疗制品基因组的分析和质量控制。

关键词：改构溶瘤腺病毒制品;基因治疗制品;DNA序列变异体;第一代测序;第二代测序,