HPLC法测定拉莫三嗪中的有关物质

来源：药物分析杂志2020年第3期北京时间：

作者：黄诺哲, 黄莹, 严全鸿

单位：广东省药品检验所, 广州 510663

摘要：目的：建立拉莫三嗪原料药有关物质的HPLC测定方法。方法：采用FeiniGen RedClassical Ⅱ C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，对拉莫三嗪的有关物质进行定量分析，以磷酸二氢钾缓冲液（取磷酸二氢钾2.7 g，加水800 mL使溶解，加三乙胺6.7 mL，用磷酸调节pH至2.0，加水至1 000 mL）为流动相A，乙腈为流动相B，梯度洗脱，流速为1.5 mL·min-1，柱温为35℃，检测波长为210 nm（用于检测2，3-二氯苯甲酸）和270 nm（用于检测除2，3-二氯苯甲酸外的其他杂质）。用HPLC-MS鉴定氧化降解溶液中未知杂质；采用Thermo AcclaimTM 120 C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）色谱柱，以甲醇-水（50∶50）为流动相，ESI离子源，正离子扫描方式，检测离子m/z为272。结果：主峰与各有关物质峰分离度良好，拉莫三嗪及各有关物质在质量浓度为0.3~4.0 μg·mL-1范围内呈良好的线性关系（r2=0.998 7），拉莫三嗪的定量下限为0.2 μg·mL-1（270 nm）、杂质Ⅰ的定量下限为0.2 μg·mL-1（210 nm）。3批样品有关物质测定结果显示，已知杂质和未知杂质均未检出。结论：本法可为拉莫三嗪质量控制提供参考。

关键词：拉莫三嗪;2，3-二氯苯甲酸;有关物质;梯度洗脱;液相色谱;质谱;方法验证,