发酵类脂溶性药物中残留DNA检测关键影响因素——溶剂的筛选与确定

来源：药物分析杂志2020年第4期北京时间：

作者：王琰, 张培培, 崔生辉, 姚尚辰, 胡昌勤, 许明哲, 张彦民

单位：1. 中国食品药品检定研究院, 北京 102629;2. 西安交通大学药学院, 西安 710061

摘要：目的： 考察不同溶剂对发酵类脂溶性药物中残留DNA测定准确性的影响并确定最佳溶剂。方法： 以脂溶性药物-环孢素为例，通过研究DNA检测全过程中各步骤溶解因素对检测结果的影响，从供试品溶液制备、供试品溶液与DNA试剂盒试剂相溶性及DNA溶液稳定性3个方面入手，对不同种类的溶剂进行考察和筛选，并根据荧光染色法的原理，采用Qubit? DNA检测试剂盒对环孢素供试品溶液中残留DNA进行测定，探讨溶剂选择的适用性和合理性。此外，应用筛选的溶剂对另一种脂溶性药物——两性霉素B中残留DNA进行了测定，进一步验证可靠性。结果： 0.1 mol·L-1盐酸-N，N-二甲基甲酰胺（1：4）、0.1 mol·L-1醋酸-N，N-二甲基甲酰胺（1：4）和0.1 mol·L-1柠檬酸-N，N-二甲基甲酰胺（1：4）3种混合溶剂对脂溶性药物均有较好溶解性并能与DNA试剂较好相溶；进一步的DNA稳定性研究结果显示，0.1 mol·L-1柠檬酸-N，N-二甲基甲酰胺（1：4）对DNA结构与性质不产生影响，稳定性最好。结论： 采用0.1 mol·L-1柠檬酸-N，N-二甲基甲酰胺（1：4）作溶剂，不仅对环孢素和两性霉素B具有较好的溶解性，而且对DNA不产生影响，稳定性较高，可实现终产品中残留DNA的准确测定。本文研究结果为脂溶性药物中残留DNA检测溶剂的选择提供了一定科学参考。

关键词：发酵类脂溶性药物;环孢素;两性霉素B;残留DNA;测定影响因素;溶剂筛选;质量控制,