尿激酶中分子组分比2种测定方法的建立和比较研究

来源：药物分析杂志2021年第1期北京时间：

作者：严翠霞, 徐明明, 程菁, 孙珍, 郑璐侠, 陈钢, 邵泓

单位：上海市食品药品检验所,国家药监局治疗类单抗质量控制重点实验室,上海 201203

摘要：目的:建立尿激酶中分子组分比测定的分子排阻色谱法与十二烷基硫酸钠毛细管电泳法,并对2种方法的方法学验证与样品测定结果比较。方法:分子排阻色谱法采用TSKgel G2000SWXL 色谱柱（7.8mm×300 mm,5 μm）,以0.1 mol·L-1 磷酸二氢钠缓冲液（pH 3.0）为流动相,流速0.5 mL·min-1,柱温35 ℃,检测波长280 nm,进样量50 μL;十二烷基硫酸钠毛细管电泳法采用未涂层熔融石英毛细管（50 μm×30.2cm,有效长度20.2 cm）,分离电压为15 kV,柱温25 ℃,检测波长214 nm,进样端为正极,5 kV 压力进样20 s。结果:通过对分子排阻色谱法与十二烷基硫酸钠毛细管电泳法的方法学验证与样品测定结果的比较,证明两种方法测定结果基本一致。分子排阻色谱法：高分子量与低分子量尿激酶质量浓度在0.05~5.1mg·mL-1 范围内呈良好的线性关系;检测下限分别为1.5 μg·mL-1 与5.1 μg·mL-1,定量下限分别为5.1μg·mL-1 与16.9 μg·mL-1;8 批样品中高分子量与低分子量尿激酶相对含量范围分别为87.0%~96.4% 与3.6%~13.0%。十二烷基硫酸钠毛细管电泳法：高分子量与低分子量尿激酶质量浓度在0.1~5.2 mg·mL-1 范围内呈良好的线性关系;检测下限分别为2.5 μg·mL-1 与51.8 μg·mL-1,定量下限分别为7.5 μg·mL-1 与155.4 μg·mL-1;8 批样品中高分子量与低分子量尿激酶相对含量范围分别为88.2%~97.3% 与2.7%~11.8%。结论:分子排阻色谱法与十二烷基硫酸钠毛细管电泳法都适用于尿激酶中分子组分比的测定并互为补充。

关键词：尿激酶,分子组分比,高分子量,低分子量,分子排阻色谱法,十二烷基硫酸钠毛细管电泳法,