食管癌耐药株Eca-109/VCR 的建立及其耐药机制初步探讨

来源：药物分析杂志2021年第3期北京时间：

作者：孙晓冉, 辛运超, 孙剑经, 李多, 张林西

单位：1.河北北方学院附属第一医院, 张家口075000;2.河北北方学院, 张家口075000

摘要：目的: 建立食管癌耐长春新碱（vincristine, VCR）细胞株 Eca-109/VCR, 并对其耐药机制进行初步探讨。方法: 采用大剂量间歇冲击给药结合时间递增的方法构建食管癌耐药株Eca-109/VCR。倒置显微镜下观察 Eca-109/VCR 形态变化;细胞计数法绘制Eca-109 和 Eca-109/VCR 的生长曲线并计算倍增时间;CCK-8 法检测VCR、fluorouracil（5-FU）、paclitaxel（PTX）对细胞的inhibitory concentration 50（IC50）及其耐药指数;流式细胞术检测细胞周期及凋亡率;免疫细胞化学、Western blot 检测Eca-109/VCR 细胞P-glycoprotein（P-gp）、multi-drug resistance related protein（MRP）的表达。结果: 历时6 个月成功构建了Eca-109/VCR。Eca-109/VCR 细胞多呈聚团生长状态, 对VCR 的耐药指数为17. 60, 并表现出多药耐药, 对5-FU、PTX 的耐药指数分别为6. 59、5. 60（P<0. 01）。与Eca-109 相比, Eca-109/VCR 生长倍增时间延长, 细胞周期分布改变, G0/G1、S 期细胞增多, G2/M 期细胞减少, 细胞凋亡率下降（P<0. 05）;P-gp、MRP 蛋白表达升高（P<0. 05）。结论: 建立了食管癌耐长春新碱细胞株Eca-109/VCR, 其多药耐药机制可能与 P-gp及MRP 表达上调有关。

关键词：食管癌,Eca-109/VCR 细胞株,多药耐药,流式细胞术,蛋白印记法,