基于HPLC指纹图谱和L-02细胞/CCK-8测定法的复方牛胎肝提取物片质量评价研究*

来源：药物分析杂志2021年第5期北京时间：

作者：武晗燕, 段艳, 周长明

单位：北京市药品检验所,国家药品监督管理局仿制药研究与评价重点实验室,中药成分分析与生物评价北京市重点实验室,北京 102206

摘要：目的： 建立复方牛胎肝提取物片高效液相色谱（HPLC）指纹图谱,结合L-02细胞/CCK-8测定法,为复方牛胎肝提取物片的质量评价提供一种新方法。方法： 选择3家生产企业生产的9批复方牛胎肝提取物片样品。采用 HPLC 法,以 0.1% 甲酸为流动相 A,0.1% 甲酸甲醇溶液为流动相 B,进行梯度洗脱;流速 1.0 mL·min-1;检测波长 260 nm;柱温30℃;进样量 20 μL。用中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012 版）建立复方牛胎肝提取物片的指纹图谱,进行相似度分析,并用L-02 细胞 /CCK-8 测定法对产品进行活性测定。结果： 建立了复方牛胎肝提取物片的 HPLC 指纹图谱,相似度计算结果在 0.963~1.000 范围内,3 家企业生产工艺稳定,同企业产品批间一致性良好。L-02 细胞 /CCK-8 测定法检测 3 家企业 9 批复方牛胎肝提取物片的活性,产品对细胞的修复率在 49%~147%范围内,不同企业产品活性存在较大差异。结论： 所建立的指纹图谱方法专属性强,高效快速,可用于考察复方牛胎肝提取物片的批间一致性。采用 L-02细胞/CCK-8测定法测定产品对细胞的修复率,明显提升了指标的科学性,改善现标准的指标钝化的现状,为复方牛胎肝提取物片的质量评价提供参考。

关键词：HPLC 指纹图谱,L-02 细胞 /CCK-8 测定法,相似度分析,细胞修复率,多组分生化药,复方牛胎肝提取物片,质量评价,

基金资助：国家药品标准提高课题资助项目（2017103）