阿莫西林胶囊热降解聚合物杂质的 2D-HPLC 分析及质谱裂解机理探讨

来源：药物分析杂志2021年第7期北京时间：

作者：姜俊, 冀峰, 陈振贺, 董静, 杨晓波, 李晓东, 曹磊

单位：1.山东省食品药品检验研究院,济南 250101; 2.岛津企业管理（中国）有限公司,北京 100020; 3.北京新领先医药科技发展有限公司,北京 100083

摘要：目的: 建立阿莫西林胶囊中热降解聚合物杂质的分析方法。方法: 采用高效凝胶排阻色谱法（HPSEC 法）,使用Shimpack Bio Diol-60（4.6 mm×300 mm,3 μm）二醇基高纯硅胶色谱柱,进样量为20 μL 并以254 nm 为检测波长,进行阿莫西林和聚合物杂质的分离。通过优化HPSEC 中流动相pH、缓冲盐浓度、有机相比例等色谱条件,结合阿莫西林13 个杂质对照品,考察不同杂质的出峰规律。采用高效二维液相色谱法（2D-HPLC 法）,使用500 μL 样品环将HPSEC 分离所得聚合物杂质通过中心切割转移到二维反相色谱中脱盐,二维采用质谱兼容流动相,高分辨质谱分析确认结构。结果: HPSEC 法中流动相pH 是影响阿莫西林与聚合物峰分离的关键因素。杂质对照品在HPSEC 的保留时间研究表明色谱分离未严格按照相对分子质量大小的顺序进行。通过对聚合物杂质K 和J 的质谱裂解行为研究揭示了β- 内酰胺类抗生素的一般裂解规律。2D-HPLC 法对阿莫西林热降解溶液深入分析,主峰前聚合物峰在二维进一步分离出14 个化合物,为阿莫西林二聚体、三聚体、四聚体及其异构体。结论: HPSEC 与RP-HPLC 结合组成的二维色谱高分辨质谱系统可作为更精准的聚合物发现的手段。

关键词：阿莫西林,β- 内酰胺类抗生素,广谱青霉素,聚合物,降解杂质,二维液相色谱,高效凝胶排阻色谱法,二维液相色谱在线脱盐技术,高分辨质谱,