基于高通量测序技术对11种乌头属药材混合粉末鉴定研究*

来源：药物分析杂志2021年第9期北京时间：

作者：撒切尔, 包书茵, 乌仁吉如拉, 奥·乌力吉, 包桂花, 许亮, 张婷婷

单位：1.内蒙古民族大学,通辽 028000; 2.辽宁中医药大学,大连 116000

摘要：目的:建立基于高通量测序技术的11 种乌头属药材混合粉末分子鉴定方法。方法:采用高通量测序技术,对11 种乌头属药材混合粉末样品中的总DNA 经提取,对ITS2 片段进行PCR 扩增,利用IlluminaMiSeq 平台对DNA 片段进行双端测序,最后采用FLASH、QIIME、GraPhlAn 及MEGA 6.0 软件对序列进行整理并聚类分析,鉴定混合粉末中的物种。结果:混合样品中得到高质量的ITS2 序列共82 348 条, 样品中乌头属物种含有序列69 814 条,比对出其中的8 个物种,即样品中含有草乌、川乌、阴山乌头、华北乌头、瓜叶乌头、毛叶乌头、花葶乌头、高乌头;未能比对出黄花乌头、松潘乌头、川鄂乌头3 种乌头属药材。结论:以ITS2 作为条形码,采用高通量测序技术,可以鉴定出乌头属药材混合粉末中的8 个物种,为混合药材的鉴定提供新思路。

关键词：高通量测序技术,ITS2,乌头属,药材,混合粉末,分子鉴定,

基金资助：蒙医防治优势病种经典方药研发平台及质量体系建设和示范研究(2018YFC1708200);内蒙古自治区科技重大专项(2019ZD004);蒙医药标准化国际科技合作项目(MDKBZH2018025);内蒙古自然科学基金项目(2018MS08124);内蒙古自治区蒙医药重点实验室建设蒙医验方木膝通痹饮治疗类风湿性关节炎实验研究(KJJH2001);蒙医验方旋覆花合剂治疗粘热病性肺炎的药效学研究