重组人促卵泡激素氧化亚基分析方法研究*

来源：药物分析杂志2022年第1期北京时间：

作者：杨慧敏, 张伟, 孙悦, 吕萍, 王绿音, 李懿, 张慧, 李晶, 梁成罡

单位：1.中国食品药品检定研究院 激素室 卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室, 北京 102629;2.中国药科大学 生命科学与技术学院, 南京 210009

摘要：目的:研究建立重组人促卵泡激素(rhFSH)氧化亚基分析方法,制备稳定的氧化亚基分析用系统适用性溶液。方法:通过加入过氧化氢氧化破坏重组人促卵泡激素,后加入甲硫氨酸终止该氧化作用,制备系统适用性溶液。采用RP-HPLC法分离分析重组人促卵泡激素氧化亚基。使用C4色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相A为0.2 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH 2.5),流动相B为80%乙腈;流速1 mL·min-1;柱温30 ℃;检测波长210 nm;梯度洗脱(0~10 min,82%A→74%A;10~25 min,74%A→60%A;25~26 min,60%A→20%A;26~56 min,20%A;56~56.1 min,20%A→82%A;56.1~75 min,82%A)。结果:加入甲硫氨酸可有效终止氧化作用,制备得到稳定的系统适用性溶液。优化建立的氧化亚基分析方法专属性良好,重复性(RSD=0.22%)、色谱柱耐用性(RSD=3.21%)、36 h内溶液稳定性(RSD=0.65%)结果良好。9批样品中氧化亚基含量范围为0.687%~1.001%。结论:优化建立的氧化亚基分析方法可对重组人促卵泡激素中的氧化亚基进行准确定量,能够用作重组人促卵泡激素的质量研究和放行检验;研究制备的系统适用性溶液可准确地对氧化亚基进行峰定位。

关键词：糖蛋白,重组人促卵泡激素,氧化亚基,反相高效液相色谱,系统适用性,定量,质量控制,

基金资助：*国家科技重大专项课题资助项目(2018ZX09101001-003-004);国家药典委员会药品标准提高课题(2018-2019)(课题编号364)